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高浓度U胁迫下植物物质成分FTIR研究 　　摘要用FTIR对500 mg U·kg-1土壤胁迫下空心莲子草、落葵和菊苣茎叶和根系的物质成分进行测定，用半定量法分析3种植物茎叶和根系红外光谱的差异，探讨高浓度U胁迫对植物物质成分的影响.结果表明：（1）3种植物茎叶和根系吸收峰峰形未发生较大改变，但吸光度变化明显，说明该浓度U对这3种植物的物质成分改变较小，含量改变较大.（2）羟基、羧基和酰胺基吸收峰发生明显位移，说明U胁迫对这些基团有明显影响，它们可能与U的吸收、络合、运输密切相关.（3）半定量分析表明，该浓度U使3种植物羟基、羧基等基团及蛋白质和糖类物质有明显的数量变化，不同植物变化不同，这可能由植物耐受U能力不同所致.因此，FTIR能快速、灵敏地检测植物在高浓度U胁迫下物质成分的变化，能解释植物吸收积累U的影响机理，可作为一种有效手段应用于U等核素对植物效应的研究. 　　关键词高浓度U胁迫；空心莲子草；落葵；菊苣；FTIR；半定量分析 　　中图分类号O657.3 文献标识码A 文章编2013 　　核能利用的发展促进了铀矿的大量开发，铀矿的开发和加工，导致铀尾矿及铀废物的大量污染.我国湖南铀尾矿库矿渣及土壤的U含量变化[15]在26.11～122.1 mg·kg-1.污染环境中的铀，因生物富集作用在人体中积累，人体肾中铀含量超 3 mg·kg-1，就会产生损害[6].人们通过各种技术来治理铀污染，植物修复是最简洁有效并对环境污染最小的生物修复技术[7].植物在吸收和富集铀的同时，铀对植物种子萌发、幼苗生长和酶活性[810]以及叶绿素含量、植株体积大小等产生影响[11]，但对植物体内物质成分有无影响，目前尚未见报道. 　　傅里叶变换红外光谱法（FTIR）是一种基于化合物中官能团和极性键振动的结构分析技术，可以帮助判断分子中含有何种官能团，更重要的是可以比较不同样品的红外光谱差异，从而反映样品在植物化学组成上的差异程度[12].目前，FTIR已广泛应用于许多研究领域，如中药材的质量鉴别[13]、高等植物的系统分类研究[14]以及重金属胁迫对植物的影响[1518].本研究采用FTIR法分析高浓度U胁迫下空心莲子草、落葵和菊苣茎叶和根系的化学组成变化，探讨高浓度U胁迫对植物物质成分的生物学效应，为铀污染土壤的植物修复提供相关参考. 　　1研究材料与方法 　　1.1实验材料 　　苋科的空心莲子草（Alternanthera philoxeroides），落葵科的落葵（Basella rubra），菊科的菊苣（Cichorium intybus L.）.U以UO2（CH3CO3）2·2H2O的形式加入. 　　1.2实验方法 　　盆栽试验，每盆土壤1 kg.按U元素含量500 mg·kg-1土壤溶解于350 mL水（预备试验得到的土壤饱和持水量）中，均匀浇淋于每盆，以清水为对照（control），重复5次.在阴凉干燥处放置8周[19]，待土壤充分吸附后播种，播种2个半月后分茎叶和根系收获，在105 ℃下杀青20 min，80 ℃烘干至恒重，研磨粉碎. 　　1.3测定方法 　　1.3.1FTIR测定在西南科技大学分析测试中心，准确称取1.5 mg样品粉末与300 mg KBr在玛瑙研钵中混匀研磨，全部转移到模具中用压片机制备出均匀、透明锭片，用美国P.E.公司的Spectrum one FTIR （扫描范围4 000～400 cm-1，分辨率为4 cm-1）测定3种植物茎叶和根系的傅里叶变换红外光谱信息. 　　1.3.2U含量测定将干燥碾磨好的样品，准确称取0.3 g，加入7 mL浓硝酸，2 mL 30%双氧水，于微波消解仪中（Mars，美国CEM 公司）消解，消解好的样品，在西南科技大学分析测试中心采用ICPMS（Agilent 7700x，美国安捷伦公司）测定U含量. 　　1.4数据分析 　　根据空心莲子草、落葵、菊苣吸收峰的吸光度值特点筛选出11个比较典型的吸收峰，并记录不同波数的吸光度.原始数据采用Origin 7.5软件作图， Nicolet Omnic 8.0软件对不同样品的FTIR谱图进行数据处理. 　　2结果与分析 　　2.13种植物茎叶和根系的FTIR图谱分析 　　红外光谱分析（FTIR）显示，空心莲子草在高浓度U处理和对照组的峰形基本保持不变，茎叶和根系的吸光度在高浓度U胁迫下都低于对照，根系的吸光度低于茎叶（图1）；落葵（图2）和菊苣（图3）与空心莲子草类似. 　　3结论 　　（1）空心莲子草、落葵和菊苣在高浓度U胁迫下和对照相比，吸收峰峰形基本未发生较大改变，吸收峰波数相对固定，说明高浓度U胁迫并未改变3种植物的基本化学组分，但吸光度有较大