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昆虫足玻片标本制作要点 　　摘要：昆虫足玻片标本制作有8个主要环节：玻片清洗、取材、标本前处理、漂洗、脱水、制片、干燥和上标签，只要通过练习，掌握制作过程中各个环节的制作要领，就能制作出合格的昆虫足玻片标本。 　　关键词：昆虫学；足玻片标本；制作 　　中图分类号：G642.1？摇 文献标志码：A 文章编号：1674-9324（2013）36-0174-02 　　昆虫学一直是生物类专业教学中的重要组成部分。而昆虫标本则是昆虫学教学必不可少的教具。昆虫足玻片标本是指将昆虫足经处理之后，放在载玻片和盖玻片之间永久保存的玻片标本，是最直观的教具和观察材料。制作昆虫足玻片标本通常包含：玻片清洗、取材、标本前处理、漂洗、脱水、制片、干燥和上标签等8个主要步骤。要完成一个合格的昆虫足玻片标本，需要注意标本制作过程中的各个环节。 　　一、玻片的清洗 　　新购买的玻片不能直接用来制作标本，因为玻片上残留的粉尘及油脂等物质会直接影响玻片标本的制作质量。因此，必须对载玻片和盖玻片进行清洁处理。玻片通常用洗衣粉溶液浸泡后清洗，将载玻片和盖玻片浸没在5%洗衣粉溶液中浸泡1～2天，取出后用清水冲洗，然后再用浓盐酸浸泡4～5小时，取出后用清水逐张冲洗干净。清洗时需要特别注意的是玻片必须一张一张分开清洗，避免玻片之间的相互摩擦造成玻片表面的划痕。清洁后的玻片可浸泡于无水乙醇中保存。使用时取出，在玻片上滴加少量二甲苯，再用擦镜纸擦干待用。 　　二、取材（解剖） 　　取材时要注意材料的完整性，通常情况下选用新鲜的昆虫标本进行取材为佳。因为干制昆虫的虫体较脆，解剖时容易断裂，无法保证材料的完整性。如因条件限制必须采用干制昆虫标本时，则需要先将标本放入回软器进行回软处理，才能进行解剖。解剖时要还要注意不同类型昆虫足的构造，在确保完整性的同时，还要保证取材的正确性，不需要的部分尽可能去除干净。另外取材时要注意材料的尺寸，因为玻片的大小有限，过大的标本是不适合用来制作玻片标本的。 　　三、标本前处理 　　刚解剖好的昆虫足因内含蛋白质、脂肪等物质是不能立即用来制片的。通常需要浸泡在10%NaOH溶液中进行处理，以去除其内含物。因为不同类型昆虫足的结构和大小差异较大，因而处理的温度和时间也不相同。控制好昆虫足在NaOH溶液中的处理时间尤为重要，处理的程度以彻底去除内含物为标准，同时要注意处理时间不宜过长，过度处理的昆虫足标本容易破损，并且会因为过于透明，影响观察效果。 　　四、（中和）漂洗 　　经过NaOH溶液处理后的昆虫足，其内部会残留部分的NaOH溶液，在制片时这些物质会与封藏剂（中性树胶）发生化学反应从而形成白雾现象，使玻片标本变得混浊不清，难以观察。因此，经过NaOH溶液处理后的昆虫足在制片前必须进行漂洗：先用10%冰乙酸溶液进行中和，然后用蒸馏水反复冲洗干净，漂洗时尽量避免移动标本，频繁移动标本容易造成标本的丢失和破损。 　　五、脱水 　　漂洗后的昆虫足富含水份，脱水的目的就是为了去除其中的水份。因为封片时使用的封藏剂——中性树胶不溶于水，通常以二甲苯作为溶剂。而标本中残留的水份遇上二甲苯也会出现白雾现象，影响标本的透明度和观察效果。因此制片前，标本必须先进行脱水。我们常采用乙醇梯度脱水法来进行脱水（即将标本从低浓度乙醇依次转移至高浓度乙醇中）。脱水不易过快，该实验中我们设置了50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、100%九个浓度梯度。这样的做法在确保彻底脱水的同时，避免了因脱水过快引起的材料收缩变形。需要注意的是：标本经无水乙醇脱水后，需要及时制片。因为经无水乙醇脱水后的标本十分硬脆，易断裂。如无法及时制片，则建议将处理好的标本保存在75%的乙醇中，待使用时再进行进一步的脱水。 　　六、制片 　　制片是整个玻片标本制作最核心的环节，即将处理好的标本用封藏剂固定封存于载玻片与盖玻片之间，以便永久保存和使用。在制片中，首先要注意标本的摆放位置和摆放姿态，一般要求标本摆放在玻片的正中间，并整理其姿态使其与自然状态一致。制片时，一般使用中性树胶作为封藏剂，而胶量的控制在制片中十分关键，因为树胶太多会增加标本片的厚度，影响标本的透明度；过多的树胶还会从盖玻片四周溢出，影响标本片的外观，有时还会造成标本片厚薄不均的现象，从而影响观察的效果；树胶过少则容易产生气泡，造成标本密封不严、标本外露，影响保存等问题。胶量的大小并非一成不变，要根据制作昆虫足标本的类型和大小作调整，但调整的幅度不会太大。气泡的产生是制片中的另一大难点。要避免气泡的产生，首先在取胶的时候不能搅动树胶，因为搅动树胶会将空气搅入树胶使树胶本身带有气泡；其次在滴胶时，胶离载玻片的距离尽量小；第三注意制片的顺序：应先将标本摆放后好再滴胶；滴完胶后，如果发