苦参碱you导人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡作用及其可能机制.docVIP

　　苦参碱诱导人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡作用及其可能机制 【摘要】 　　目的 ：探讨苦参碱（MT）诱导人肺鳞癌细胞株SK-MES-1凋亡作用及其抗肿瘤机制。方法：培养人肺鳞癌细胞株SK-MES-1，用不同浓度的MT处理SK-MES-1细胞，用MTT法检测MT对SK-MES-1细胞生长增殖的抑制作用；流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期；流式细胞术检测细胞相关凋亡蛋白Bcl-2、bax、caspase-3表达。结果：MT抑制SK-MES-1细胞增殖和诱导SK-MES-1细胞的凋亡作用均呈剂量和时间依赖性。与对照组相比，苦参碱处理后的SK-MES-1细胞G0/G1期百分比明显增高，S期细胞比例下降。Bax和capase-3表达增强，Bcl-2表达下调。结论：MT在体外能抑制人肺鳞癌细胞株SK-MES-1增殖，诱导细胞凋亡，其诱导作用具有明显的量效和时效关系，可能与抑制Bcl-2活性、激活bax和capase-3有关。 【关键词】 苦参碱 肺鳞癌 细胞凋亡 SK-MES-1　　Abstract: Objective: To explore the effects of matrine on the cell cycle and apoptosis in human lung squamous cell carcinoma SK-MES-1 cells and explore the possible mechanisms. Methods: The effect of matrine on cell proliferation was assessed using MTT assay. The cell cycle arrest and the apoptosis rate induced by matrine were determined with flow cytometry. The expression of caspase-3，Bcl-2 and Bax proteins were assayed by flow cytometry. Results: Matrine inhibited the proliferation of SK-MES-1 cells in a dose-and time-dependent manner. Compared with the control group，the matrine-treated cells showed increased cell percentage arrested in G0/G1 phase with decreased S-phase cells. After treatment of 48 hours，the apoptosis rate was increased. The expression of caspase-3 and Bax increased. The expression of Bcl-2 decreased. Conclusion: Matrine can inhibit SK-MES-1 cell proliferation，cause cell cycle arrest at G0/G1 phase，and induce apoptosis in a dose-and time-dependent manner， which may be related to activation of caspase-3 and Bax and suppression of Bcl-2.　　Key words: matrine；lung squamous cell carcinoma；cell apoptosis；SK-MES-1 cells 　　苦参碱（MT）是苦参根及苦豆子等中草药的活性成分， 是苦参碱类生物碱的代表，属于四环的噻嗪啶类，具有抗炎、免疫抑制、抗病毒、抗肿瘤等作用[1-2]。国内外研究发现MT对多种肿瘤细胞有一定的杀伤作用[3]。本研究为苦参碱对人肺鳞癌细胞株SK-MES-1增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响， 探讨其对人肺鳞癌可能的作用机制。 　　1 材料和方法 　　1.1 主要试剂 　　苦参碱由西安林海生物工程有限公司提供。RPMI1640、胰蛋白酶及胎牛血清为Gibco产品。四甲基偶氮唑盐（MTT）、二甲基亚砜（DM-SO）、牛血清白蛋白（BSA）均为Sigma公司产品。Bcl-2、bax和caspase-3多克隆抗体购自cellsignal公司。 　　1.2 细胞培养 　　人肺鳞癌细胞株SK-MES-1购自中科院细胞库，常规培养于含10%新生牛血清的RPMI1640培养液中，置于37 ℃，5% CO2培养箱内传代培