临床肿学五年制教学.ppt

* * * * * 二、肿瘤细胞病理学检查 1、常用方法、涂片制作及应用 脱落细胞学检查：适用于宫颈刮片、痰、各种内镜 刷片、胸水、腹水、尿液、乳头溢液等。 细针穿刺细胞学检查：适用于内镜检查不能达到、 又不能进行脱落细胞检查的某些器官或肿瘤 浅表部位直接穿刺（如淋巴结、甲状腺、乳腺等），深部组织超声或X线引导下穿刺（肝、肺、腹膜后等） 标本制作：取材后立即涂片（厚薄均匀），置于95%乙醇或乙醇乙醚混合液固定15分钟（防干燥、避免自溶） 染色方法：巴氏（Papanicoloau）法，瑞氏（Wright）法、吉姆萨（Giemsa）法和HE法等 2、细胞病理学诊断 基本内容：同组织病理，注明涂片制作及染色方法 诊断报告基本分类 （1）直接表述性诊断：根据形态学观察实际情况，作出诊断。包括肯定性诊断、意向性诊断、描述性诊断、无法作出细胞学诊断 （2）The Bethesda System（简称TBS）报告系统：用于宫颈细胞学诊断或甲状腺细针穿刺细胞学诊断 （3）间接分级性诊断： 三级法：阳性、可疑和阴性。 巴氏法：恶性、高度可疑恶性、可疑恶性、非典型性 和阴性五级 -----------肿瘤细胞病理学检查 3、细胞病理学报告解读 细胞病理学诊断作为诊断病理学的重要分支，在疾病诊治上具有与组织病理学相似的重要地位和作用，不允许出现差错和对检查结果任意解读 WHO建议使用直接表述性诊断报告模式，弃用巴 氏五级法和三级法等数字式分级诊断方式 对于特殊类别检查则推荐使用相应的报告系统， 比如宫颈细胞学和甲状腺细针穿刺细胞学使用各自的TBS报告系统 -----------肿瘤细胞病理学检查 4、细胞病理学检查优点和局限性 优点：取材方便，损伤小；所需设备简单；操作、 制片和检查过程快速；易于推广和重复检查 对难以获取组织进行病理诊断的病例，细胞学诊断具有重要价值。是一种理想肿瘤筛查及普查方法 局限性： 假阴性：受取材等因素影响，一般有10％左右假阴性 因此，细胞学检查阴性不代表没有肿瘤 假阳性：在非恶性肿瘤患者标本中查见恶性细胞 假阳性率≤1%。因此细胞学诊断应密切结合临床 可靠性较组织病理学诊断差，不能显示肿瘤确切部位 -----------肿瘤细胞病理学检查 一、组织化学技术及应用 二、免疫组织化学技术及应用 三、细胞遗传学和分子生物学技术 四、流式细胞术 五、电子显微镜技术 六、图像分析技术 七、生物信息学 第三节 肿瘤病理学诊断常用技术及应用 ------肿瘤病理学诊断常用技术及应用 一、组织化学技术及应用 组织化学（histochemistry）技术又称特殊染色 是应用某些能与细胞内化学成分特异结合的显色试剂 原位显示病变细胞特殊化学成分（蛋白、核酸、糖类等） 常用特染：PAS染色、网状纤维染色、淀粉染色、 抗酸染色、脂肪染色、黏液染色、六胺银染色等 用途：协助诊断。如抗酸杆菌、真菌检测等在诊断结核、真菌感染方面有较重要意义；PAS可显示腺泡状软组织肉瘤细胞质内的结晶 血管周细胞瘤网染 腺泡状软组织肉瘤 PAS染色 特殊染色 ------肿瘤病理学诊断常用技术及应用 二、免疫组织化学技术及应用 免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）技术 是利用抗原-抗体特异性结合原理，用已知抗体或抗原检测和定位组织中待测物质的一种技术 1、检测方法：链亲和素生物素（LSAB）法；标记的葡 聚糖聚合物（LDP）法；En Vision两步法 2、抗体选择： 多克隆抗体：敏感性高，但非特异性交叉反应较多 单克隆抗体：抗原特异性强，但敏感性较低 目前使用兔源性单克隆抗体敏感性高 ------肿瘤病理学诊断常用技术及应用 3、优点：特异性强、敏感性高、定位准确，将形态、 功能和代谢密切结合一起。是病理诊断及鉴别 诊断中必不可少的常规技术 4、局限性：①没有绝对特异抗体，一种抗原可在多种肿瘤中表达；②相当数量肿瘤缺乏特异抗原表达；③部分肿瘤因分化极低不表达相关抗原；④有时不同抗体滴度有不同阳性结果；⑤内源性生物素可导致假阳性；⑥不同实验室间结果不一定完全一致；⑦定性检查 实验室质量控制和规范化正确技术操作是免疫组化结果可靠的前提及保障 ------肿瘤病理学诊断常用技术及应用 5、免疫组化应用 辅助肿瘤分类；