抗生素类药物的分析课件_3.pptVIP

第十一章 抗生素质量的复杂性 氨苄西林（氨苄青霉素） 头孢羟氨苄 （二）旋光性 （三）紫外吸收特性 （四）β–内酰胺环 三、特殊杂质检查 1、聚合物：分子排阻色谱法 凝胶色谱柱－分子筛机制 色谱柱: 亲水硅胶、凝胶或葡聚糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶； 流动相: 水或缓冲液 2、有关物质和异构体 头孢呋辛酯中有关物质和异构体的检查反相HPLC 法 固定相：ODS；流动相：0.2mol/L磷酸二氢铵-甲醇（62:38） 3、吸光度 杂质吸光度、药物吸光度 4、有机溶剂 气相色谱法测定溶剂残留量 5、结晶性 偏光显微镜法和X射线粉末衍射法 庆大霉素C复合物 庆大霉素C1 R3=H R1、R2=CH3 庆大霉素C2 R3=R2=H R1=CH3 庆大霉素C1a R3、R1、R2=H 庆大霉素C2a R3=CH3 R1= R2=H 　 链霉胍特有反应 ChP（2005）采用蒸发光散射检测器测定庆大霉素C组分，以C18作固定相；0.2mol/L三氟乙酸－甲醇作流动相 小诺霉素作内标，考察系统适用性 血清中庆大霉素的HPLC法 血浆样品的预处理 离子对色谱法的目的： 除去氨基酸、肽、胺的干扰 选用OPA为荧光衍生化试剂 采用柱后衍生化法 （四）硫酸盐测定：剩余EDTA络合滴定法 微生物检定法 各国药典主要采用 HPLC法 常用于体内药分 四、含量测定 链霉素、庆大霉素 微生物检定法 本法系利用抗生素在琼脂培养 基内的扩散作用量反应平行线原理 的设计，比较标准品与供试品两者 对接种的试验菌产生抑菌圈的大小 ，以测定供试品效价的一种方法。 第四节 四环素类抗生素 A B C D 一、 结构与性质 多含结晶水 两性： 酚羟基、烯醇型羟基： 弱酸性 二甲氨基： 弱碱性 （一）酸碱性与溶解度 与酸、碱均能成盐 强酸或强碱中溶解度↑ 吸湿性 pH3-7.5 荧光 （二）旋光性 （三）UV和荧光 （四）与金属离子络合 与金属离子生成有色配位化合物 Ca2+ Mg2+ Fe3+ Al3+ （五）稳定性 1. 差向异构化 淡黄---黑色 蓝色荧光 △ Cu2+ pH3.8 β-内酰胺类 NaOH 呈色 Fe3+/3 H+ （三）呈色反应 1. 羟肟酸铁反应 （红、棕、褐） Fe3+/3 H+ 2. 茚三酮反应 △ α-氨基、伯胺 某些羟基胺类 酮式 烯醇式 茚三酮 茚三酮 缩合 蓝紫色 3. 与重氮苯磺酸反应: 酚羟基 1.K+、Na+反应 2.重氮化-偶合反应 重氮化-偶合反应 （四）各种盐的反应 如：头孢他啶聚合物的测定 固定相：葡聚糖凝胶G-10（ 40?120μm ） 流动相A：3.5%硫酸铵的0.1mol/L磷酸盐缓冲液 流动相B：水 检测波长：254nm 对照品溶液：头孢他啶对照品 100μg/ml 系统适用性试验：理论塔板数和拖尾因子用1mg/ml蓝色葡聚糖2000、流动相A测定；重复性用对照品溶液、流动相B测定。 N不低于900，拖尾因子2，峰面积的RSD应小于5.0%。测定方法：进样供试液，用流动相A；进样对照液，用流动相B。以外标法计算，含头孢他啶聚合物以头孢他啶计不得超过0.3%。 内标法＋校正因子 外标法 特点: 快速、高效、灵敏 专属性强、重现性好 一法多用（鉴别、检查、含测） 四、含量测定 反相高效液相色谱法 第三节 氨基糖苷类抗生素 链霉素、庆大霉素、卡那霉素、新霉素、巴龙霉素等 链霉素 坂口反应 麦芽酚反应 UV 3个碱性中心 链霉胍 链霉糖 N-甲基-L- 葡萄糖胺 Elson-Morgan反应 庆大霉素（庆大霉素C的复合物） 5个碱性中心 一、结构与性质 （一）碱性 多与硫酸成盐 碱性中心 链霉素 3个 庆大霉素 5个 （二） 溶解性 （三） 旋光性 多羟基和碱性基团，水溶性好 硫酸盐易溶于水，不溶于乙醇、三氯甲烷、乙醚 链霉素 pH5～7.5 庆大霉素 pH2～12 稳定 （四）：苷的水解和稳定性 （五）：UV 酸性、碱性条件均易水解 一般分解为一分子苷元和一分子双糖，条件剧烈可继续分解 链霉素:230nm、庆大霉素等无 △ 羟基胺结构 （二