高三实验基础知识总结.docVIP

实验基础知识总结 一、生物学中常用的试剂及用途 1、斐林试剂： 成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.05g/ml CuSO4（乙液）。用法：将斐林试剂甲液和乙液等体积混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。 2、双缩脲试剂：成分：0.1g/ml NaOH（液）和0.01g/ml CuSO4（液）。用法：向待测液中先加入2ml液，摇匀，再向其中加入3~4滴液，摇匀。如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。 3、苏丹Ⅲ：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色（被苏丹Ⅳ染成红色）。 4、碘液：用于鉴定淀粉的存在。淀粉遇碘变蓝。 5、二苯胺：用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺（沸水浴）会被染成蓝色。 6、甲基绿：用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿（常温）会被染成蓝绿色。 吡啰红：用于鉴定RNA。RNA遇吡啰红（常温）会被染成红色。 7、50%的酒精溶液：在脂肪鉴定中，用苏丹Ⅲ染液染色，再用50%的酒精溶液洗去浮色。 8、75%的酒精溶液：用于杀菌消毒，75%的酒精能渗入细胞内，使蛋白质凝固变性。低于这个浓度，酒精的渗透脱水作用减弱，杀菌力不强；而高于这个浓度，则会使细菌表面蛋白质迅速脱水，凝固成膜，妨碍酒精透入，削弱杀菌能力。75％的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。 9、95%的酒精溶液： （1）用于提取叶绿体中的色素； （2）冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。 11、15%的盐酸：和95%的酒精溶液等体积混合配置成解离液，用于解离根尖。 1、龙胆紫溶液：（浓度为0.01g/ml或0.02g/ml）用于染色体着色，可将染色体染成紫色，通常染色3~5分钟。（也可以用醋酸洋红染色） 1、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁：用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶） 14、亚甲基蓝：用于活体染色（着色的是死细胞）或检测污水中的耗氧性细菌（细菌的氧化可使之褪色）。 15、澄清石灰水（Ca(OH)2）：鉴定CO2，使澄清石灰水变浑浊。 16、层析液：（成分：20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成，也可用93号汽油）可用于色素的层析，即将色素在滤纸上分离开。 17、二氧化硅：在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分。 18、碳酸钙：研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。 19、0.3g/mL的蔗糖溶液：相当于30%的蔗糖溶液，比植物细胞液的浓度大，可用于质壁分离实验。 20、秋水仙素：用于单倍体育种和多倍体育种。作用于萌发的种子或幼苗，可使染色体组加倍，原理是可抑制正在分裂的细胞纺锤体的形成。 21、0.1g/mL的柠檬酸钠溶液：与鸡血混合，防凝血。 22、氯化钠溶液：①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol/L时DNA的溶解度高，在氯化钠浓度为0.14 mol/L时，DNA溶解度最低。②浓度为0.9%时可作为生理盐水。 23、食盐（NaCl）：腐乳制作时加入食盐有抑制杂菌生长的作用。 24、料酒（酒精）：腐乳制作时加入，有抑制杂菌生长和使腐乳具有独特香味的作用。 24、胰蛋白酶：①可用来分解蛋白质；②可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散。 25、氯化钙：增加细菌细胞壁的通透性（用于基因工程的转化，使细胞处于感受态）。 26、磷酸缓冲液：凝胶色谱法分离蛋白质时的洗脱液。 27、肝素：精子获能 28、动物血清：动物细胞培养液的成分，为细胞生长提供营养物质和一些必需的生长因子。 二、生物学中常用的实验方法 1、温度控制 生物学实验中对温度的控制经常采用水浴加热的方法，如下面列举的（1）（2）（3）。 （1）还原糖的鉴定——50～65℃温水浴 （2）DNA的鉴定——沸水浴 （3）PCR：高温变性——90～95（95）℃；低温退火——55～60（55）℃； 中温延伸——70～75（72）℃ （4）果酒制作——18～25℃果醋制作——30～35℃ （）腐乳制作——毛霉在豆腐块上生长时，笼屉温度控制在15～18℃ （）植物组织培养——脱分化形成愈伤组织时：23～26℃恒温避光条件 2、显微观察法：如观察叶绿体和细胞质流动、观察植物细胞质壁分离和复原实验、观察植物细胞有丝分裂、观察蝗虫精母细胞减数分裂装片、观察土壤中的小动物等。 3、同位素标记法：如噬菌体浸染细菌的实验，用18O2和14CO2追踪光合作用中氧原子和碳原子转移途径的实验、分子杂交技术、DNA半保留复制的实验等 （1）研究生物体、细胞内某些物质的合成 例1：将植物细胞放在有3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸存在的环境中，温育数小时。然后将细胞粉碎并轻摇匀浆，进行分级离心以获取各