临床尿液粪便检验及微生物标本处理课件PPT课件.ppt

临床尿液、粪便检验及微生物标本处理;尿液常规检验;二、尿液的干化学检测;*;*; 1．检测项目 尿液的酸碱度（pH）、比密（SG）、蛋白质（PRO）、葡萄糖（GLU）、酮体（KET）、胆红素（BIL）、尿胆原（URO）、 亚硝酸盐（NIT）、白细胞（LEU）、隐血（BLD）、维生素C（Vit C），一个或多个检测内容可组成不同的组合。 2．试带反应原理 ⑴酸碱度（pH）：采用pH指示剂法。用甲基红（pH4.6～6.2）和溴麝香草酚蓝（pH6.0～7.8）两种指示剂适量组合成为复合pH试剂模块，其呈色范围为pH4.5～9.0，颜色发生橙红、黄绿及蓝色变化。; ⑵比密（SG）：采用离子交换pH指示剂法。尿液中电解质释放出的阳离子与试带中的离子交换体中的H＋交换，释放出的H＋与酸碱指示剂反应，根据指示剂显示的颜色（蓝、绿、黄）可换算尿液中的电解质浓度，以电解质浓度来代表密度，从而得出比密值。 ⑶尿蛋白（PRO???：采用 pH指示剂蛋白误差法。试剂模块中主要含有酸碱指示剂溴酚蓝、枸橼酸缓冲系统和表面活性剂。在Ph3.2时，溴酚蓝电离、带负电荷并释放H＋,带负电荷的溴酚蓝与此时带正电荷的蛋白质（白蛋白）生成复合物，导致溴酚蓝进一步电离产生更多的H＋，当超过缓冲范围时，指示剂发生颜色改变（黄、绿、蓝），变色程度与蛋白质含量成正比。; ⑻尿胆原（URO）：采用①醛化反应法：在强酸条件下尿胆原和对-二甲氨基苯甲醛发生醛化反应，生成樱红色缩合物。②偶氮法：在强酸条件下尿胆原和对-四氧基苯重氮四氟化硼发生重氮盐偶联反应，生成胭脂红色化合物。 ⑼尿胆红素（BIL）：采用偶氮法。在强酸性介质中，胆红素与试带上的二氯苯胺重氮盐起偶联作用，生成红色偶氮化合物。 ; ⑽ 尿隐血（BLD）：采用过氧化物酶法。血红蛋白中亚铁血红素具有弱的过氧化物酶样作用，以催化H2O2作为电子受体使色原（常用的有邻联甲苯胺、氨基比林、联苯胺等）氧化呈蓝绿色，其颜色的深浅与血红蛋白成正比。 ⑾ 尿维生素C（VitC）：采用还原法。试剂模块中含有2，6-二氯酚靛酚钠、中性红、亚甲基绿磷酸二氢钠和磷酸氢二钠，维生素C能还原氧化型染料，而使指示剂发生由绿或深蓝至粉红色的颜色变化，颜色的深浅与VitC含量成正比。也有采用VitC和作为色素原的磷钼酸反应，形成钼蓝的原理。;*;【操作】 1．混匀尿液 2．浸湿试带 3．沥去多余尿液 4．比色与分析 5．报告方式 ; 【注意事项】 1．熟悉试带特性 必须了解所用试带各膜块反应原 理、药物干扰以及参考范围等，掌握试带检测每一成分的敏感度和特异性。很多中间环节和干扰因素都可影响颜色变化而导致假阳性或假阴性。同一检测项目，不同厂家所用的色素原可能不同，因此存在显色差别 2．注意试带保存条件 尿试带应根据厂家推荐的条件（如温度、暗处等）保存，在有效期内使用。不应将试带放在直射光下照射或暴露在潮湿环境中，应保存在厂商提供的容器中，不可更换保存容器。; 3．规范操作 （1）试带从冷藏冰箱中拿出后，待平衡至室温再打开盛装的筒盖。一次只取所需要量的试带，并应立即将瓶盖盖好。多余试带不得放回原容器中，更不应该合并各瓶的试带。 （2）试带与尿液的反应时间需严格遵循产品说明书的规定，操作中注意切勿触摸试带上的反应检测模块。 （3）试带浸入尿液标本的时间应在1～2s，所有试剂模块，包括空白和参比模块，要全部渗入尿液中，试带上过多的尿液标本应去除干净。;4、室内质控 试带法检测应至少使用阴性和阳性质控品进行室内质控，每工作日至少检测1次。 结果偏差不超过1个等级，且阴性不可为阳性，阳性不可为阴性。 应制定程序对失控进行分析并采取相应的措施，应检查失控对之前患者样品检测结果的影响。 ;尿液常规检验;尿液常规检验;尿液常规检验;镜检标准: 1、泌尿道疾病、肾病、糖尿病、应用免疫抑制剂和妊娠者尿标本必须镜检。 2、尿标本外观、浊度不正常必须镜检。 3、同时满足以下5项条件：①尿标本外观、浊度正常；②白细胞酯酶结果为阴性；③亚硝酸盐结果为阴性；④尿蛋白结果为阴性；⑤隐血（血红蛋白或红细胞）结果为阴性，可不镜检。否则必须进行镜检复核。 ;尿沉渣的检测方法： 1、直接镜检法：又称混匀一滴尿法 2、自然沉降法：尿液置室温下一定时间(15-30min)，移去上层尿液，余0.2mL左右，混匀镜检。 3、离心镜检法：尿液经一定转速一定时间离心后，移去上层尿液，余0.2ml，混匀镜检。 4、染色法：常用结晶紫—沙黄法（Sternheimer-Malbin，S-M）对尿沉渣中的有形成份进行染色后镜检，提高尿沉渣的识别率和检出率。 5、尿沉渣计数板法：取10ml尿液于离心