紫外分光光度计法测定载药纳米纤维毡药物释放性能.docVIP

紫外分光光度计法测定载药纳米纤维毡药物释放性能 　　摘要： 　　采用紫外分光光度计法这种测定溶液中溶质含量的常用方法，对静电纺丝得到的载药纤维毡的药物释放情况进行测量分析，对比不同溶解环境和测试流程对药物释放性能测试结果的影响，分析采用紫外分光光度计法测试载药纤维毡体外释放性能的可行性。结果发现，在确定漏槽条件前提下，采用紫外分光光度计法和恒温摇床振荡的方式，可以对药物溶出含量大于1μg/mL的药物释放行为进行有效表征，且测试结果的重复率高，是一种测试药物溶出的好方法。 　　关键词：紫外分光光度计；漏槽条件；聚乳酸-羟基乙酸共聚物；静电纺丝 　　在中国、美国、英国、日本等不少国家，药物释放度检查实际是指药物固体制剂按照各国药典规定的方法，在一定时间内从固体制剂溶入介质的累计百分率（以被测试剂标示量计算）。释放度是评价药物制剂的质量、固体制剂的生物利用度以及筛选固体制剂工艺、处方和剂型的重要手段[1-2]。药物释放度是随着科学技术和生物药剂学的发展而迅速发展起来的一种新的药品检验方法。现有的释放度测定方法基本上是针对缓释制剂、控释制剂、肠溶制剂及透皮贴剂等药物制剂提出，对目前重点研究的有关载药纤维毡的溶出度测定尚无明确的表述，各研究报道仅在试验部分对测试过程进行了简单的描述[3-8]。 　　载药纤维毡中药物含量相对于药物制剂中载体药物的含量低，对测试所用仪器精度要求较高；载药纤维毡容易漂浮在缓冲溶液中不易浸润，从而难以保证药物有效释放；药物体外释放时需要模拟人体的真实环境（即漏槽条件的确定），一系列的问题导致了现有的试验装置难以较真实地模拟载药纤维毡的药物释放行为。 　　本研究选择美国食品和药品管理局（FDA）已批准可应用的乳酸（lactic acid）和羟基乙酸（glycolic acid）共聚物[Poly（L-lactide-co-glycolide），PLGA]为原料通过静电纺丝制备纳米纤维毡作为研究对象，以水溶性盐酸四环素（tetracycline hydrochloride，Tet）为模拟药物[9-11]，详细研究了采用紫外分光光度计法测试和评价PLGA载药纳米纤维在模拟肠液中的体外药物释放行为。 　　1 试验部分 　??1.1 试验原料和测试仪器 　　聚乳酸-羟基乙酸/盐酸四环素（PLGA/Tet）静电纺丝纤维毡由实验室自行制备，三氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺、浓盐酸、氢氧化钠、磷酸二氢钾、氯化钠等均为分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司。 　　所采用的测试设备如下：台式离心机（TDL-60B，上海安亭科学仪器厂）、曲线控制真空干燥箱（DZF-6050B，上海安亭科学仪器有限公司）、电热恒温鼓风干燥箱（DHG-9140A）、集热式恒温加热磁力搅拌器（DF-101S，巩义市予华仪器有限责任公司）、取液器（QY-1000A，北京青云航空仪表有限公司）、电子天平（ALC-110.4，深圳市新德亚精密仪器有限公司）、精密pH计（PHS-3C，上海仪电科学仪器股份有限公司）、紫外可见分光光度计（UV756CRT，上海佑科仪器仪表有限公司）、恒温振荡器（SHZ-82A，国华企业）。 　　1.2 试验方法与步骤 　　1.2.1 人工模拟肠液的配制 　　根据2010年版《中国药典》（二部）附录Ⅳ中D缓冲液的配制方法，配制pH=6.8的磷酸缓冲溶液[以下简称为PBS（pH=6.8）缓冲溶液]作为本试验体外释放的介质。 　　1.2.2 紫外分光光度计测定波长和最小分辨率的确定 　　利用紫外分光光度计测量药物的含量[3， 6， 11-15]，这一方法的可操作性、灵敏性和重复性是需要考虑的重要因素，吸收波长和最小分辨率的确定直接决定着测试数据的有效性。 　　（1） 标准曲线的绘制 　　称取一定量的Tet，置于50mL容量瓶中，用PBS溶液适量振荡使其完全溶解，加PBS溶液溶解并稀释至刻度，作为贮备液。分别从贮备液中量取1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL、7mL、8mL置于10mL的容量瓶中，用PBS溶液稀释至刻度，摇匀，得到系列标准溶液。按照分光光度法[2010年版《中国药典》（二部）附录Ⅳ]，选取360nm为工作波长测定吸光度[9， 16]，以吸光度（A，Abs）对浓度（C，μg/mL）作线性回归，绘制标准曲线y=0.034x+0.002（R2=0.999）。结果表明，Tet在1μg/mL～70μg/mL范围内浓度和吸收度呈良好的线性相关性。 　　由此表明，在所测质量浓度范围内，溶液的吸光度与质量浓度呈良好的线性关系，具有较高的置信度。 　　（2） 最小分辨率的确定 　　由于紫外分光光度计仪器的最小分辨率为0.001Abs，最大吸光度为3.000Abs，仪器的读数偏差在±0.004Ab