721分光度计的操作.pptx

生物化学基本实验技能训练（二） ;实验目的(Purpose);主要内容(Contents);吸光光度法(Spectrophotometry )的原理;光的基本性质 ;物体的颜色是哪里来的？ ;物质对光的选择性吸收 ;溶液的颜色 当白光通过某一溶液时，该溶液会选择性地吸收某些波长光而让那些未被吸收的光透射过去，溶液呈现透射光的颜色。 被吸收的光与透射过去的光称为互补色光;吸光光度法(Spectrophotometry )的原理; 吸收曲线(absorbance curve) 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，即可得到一条吸光度随波长变化的曲线，称之为吸收曲线或吸收光谱。 光吸收程度最大处的波长，称为最大吸收波长(maximal absorbance wavelength)，常用λmax表示。 在正常情况下，选用不同浓度的某种溶液，最大吸收波长是固定不变的。 ;;透光率(T)与吸光度(A) ; Lambert-Beer定律(Lambert-Beer’s Law); Lambert-Beer定律(Lambert-Beer’s Law);Lambert-Beer定律的偏离(Limitations of the Lambert-Beer’s law ) ;吸光光度法的原理 吸光度的测量 定量分析方法 721E分光光度计的操作方法 721E分光光度计操作练习 ;仪器结构：;测量条件的选择;参比溶液的选择 ;吸光光度法的原理 吸光度的测量 定量分析方法 721E分光光度计的操作方法 721E分光光度计操作练习 ;定量分析方法-1;定量分析方法-2;定量分析方法-3;吸光光度法的原理 吸光度的测量 定量分析方法 721E分光光度计的操作方法 721E分光光度计操作练习 ;721E分光光度计(Spectrophotometer )的结构 ;功能键介绍 1．电源开关 2．“波长调节”旋纽：设置波长。360-760nm. 3．方式设定键（MODE）：设置测试方式：T与A 4． “0％T”键：将比色皿架处于“调零透射比”位置。 T状态下调T为零。波长不变时无需调“ 0％T”键 5．“100%T／0A”键：使比色皿处于“参比样品”位，用于调整“T为100%”或“A为零”。当波长改变时，须重新调整。 6．比色皿架：插放比色皿，有4个槽位。 7．拉杆：推或拉比色皿架拉杆，听到“咔嚓”声时，比色皿已置光路中。第一声“咔嚓”，表示比色皿处于“参比样品”位，第二声“咔嚓”， 表示比色皿处于“调零透射比” ;仪器预热与调试;样品测试;Blank;吸光光度法的原理 吸光度的测量 定量分析方法 721E分光光度计的操作方法 721E分光光度计操作练习 ;721E分光光度计操作练习;操作（Method）;讨论（Discussion）