活体生物发光和荧光成像技术2012,8.ppt

 活体生物发光和荧光成像技术应 用 介 绍 QQ: 1055873363 021 invivoimaging@ 2012年8月8日 仪器结构与组成 NightOWLⅡLB983 视野连续可调，自动聚焦 3种荧光激发光源配件 环状照射装置 鱼尾型照射装置 鹅颈管照射装置 散射光滤光片 90 W 钨灯光源 200 - 1100 nm可选滤光片 祛除宇宙射线和背景 视野校准 定量分析功能 原始数据与处理后数据分开存档（根据GLP规则） 三种图像输出模式 成像原理与特点 目前的活体生物体内成像技术和方向 可见光及荧光成像 --生物发光 （Bioluminescence） 与荧光（Fluorescence） 正电子衍射成像（Positron-Emission Tomography，PET） --放射性标记葡萄糖导入体内，被分裂旺盛组织吸收，常用于检测肿瘤的良恶性 单光子衍射(Single-Photon-Emission Computed Tomography,SPECT) 超声（Ultrasound） -- 物理学方法 计算机断层摄影（Computed Tomography ，CT） --断层扫瞄技术，X-ray的衍生，物理学方法 核磁共振（Magnetic Resonance Imaging ，MRI） --包括功能性核磁共振（Functional MRI，fMRI）, 心血管核磁共振（Cardio-vascular MRI ，cMRI），等等 几种常用活体体内成像技术的比较 标记细胞发光强度与定量分析 小鼠皮下总计1000个 细胞或每mm2 20个细胞可以很容易地被检测到，探测极限是一丛150 – 250个细胞. 在微孔细胞板中少到10 个细胞可以检测到. 如何提高灵敏度 生物发光的应用 肺癌模型 乳腺癌原位接种 原位胰腺癌模型 白血病模型 BCL6 enables Ph1 acute lymphoblastic leukaemia cells to survive BCR–ABL1 kinase inhibition 2011年5月 NATURE U87 脑胶质瘤成像 cancer research 2011,8 骨肉瘤转移机理研究 肿瘤转移 利用转基因技术自发肿瘤的研究 抗体药物研究 研究干细胞造血作用 心脏内成像 免疫治疗研究 外源质粒在体内表达 实验性心内膜炎症的抗生素筛选大鼠模型 细菌的感染模式研究 基因治疗载体的构建 A genetically humanized mousemodel for hepatitis C virus infection 体内蛋白质-蛋白质之间的相互作用 LUC N端 与 C端 分开时并不发光 蛋白质A 与蛋白质B 分别与LUC N端 和 C端 连接 两组蛋白由不同的质粒诱导表达 活体动物体内观察细胞凋亡 活体动物细胞及组织特异性基因表达 构建双重标记的细胞株(RENILLA FIREFLY LUCIFERASE), 识别不同底物的发光酶 研究基因的启动子控制 FIREFLY LUCIFERASE 表达, 与兴趣基因平行表达. RENILLA LUCIFERASE 作为内参, 标记细胞数量 转基因动物的应用 药物诱导的IL-1β基因表达 荧光素酶基因标记的肿瘤细胞 标记细胞的方法基本上是通过分子生物学克隆技术, 将荧光素酶的基因插到预期观察的细胞的染色体内，通过单克隆细胞技术的筛选, 培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株。基因、细胞和活体动物都可被荧光素酶基因标记。 发光数与细胞数成正比。相对定量。活体动物光学成像技术采取绝对光子数的计算方法，记录单位时间内、单位面积、单位角度接受到的光子数。这样，不同时间、不同仪器的测量结果可以进行比较，具有绝对的定量意义。每一个新标记的细胞株都要进行全面的定量分析才能用于定量实验，其中包括在体外和体内固定位置细胞发光的标准曲线。活体动物光学成像提供的每一种荧光酶标记的细胞株都做过精确全面的分析。我们也为客户免费提供这些分析的方法。 抗癌新药托普替康应用该技术观察药效。 在用该技术进行抗肿瘤新药的研究方面，主要是药效学评价。