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银杏叶及野生榛蘑中硒分布研究

银杏叶及野生榛蘑中硒分布研究   摘要:探讨了银杏(Ginkgo biloba)叶及野生榛蘑(Armillaria mellea)中不同溶解态硒的含量分布。比较了2种植物在热水、0.1 mol/L 的醋酸溶液、盐酸溶液、EDTA溶液以及氯化镁溶液中硒的浸出率。结果表明,浸提能力的大小不仅取决于浸提的方法,而且还受到浸提溶剂的极性以及浸提时间等因素影响。   关键词:分子荧光法;银杏(Ginkgo biloba)叶;榛蘑(Armillaria mellea);硒   中图分类号:0657 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2013)18-4494-03   近年来,银杏(Ginkgo biloba)被报道具有多种功能成分,其功效分析一直是国内外研究热点。野生榛蘑(Armillaria mellea)可作调味品或配菜用,其菌丝体富含蜜环菌香豆素和麦角甾醇等化合物,榛蘑发酵制剂对胆囊炎和肝炎疗效显著[1,2]。硒是一种准金属元素,属于第ⅥA族元素,地壳中硒的丰度仅为0.05~0.09 μg/g。近年来,硒在治疗癌症、心血管病、糖尿病等疾病的功效引起了人们的重视[3-5]。硒存在的形态不同,其化学结构及理化性质也不同。硒在植物中主要以无机硒[3]以及有机硒形态存在[4],其中有机硒包括硒蛋白、硒代半氨酸、硒代胱氨酸、硒多糖等,其结构性质的差异是造成硒在不同溶剂中溶解度不同的主要原因[6-8]。本试验通过分析不同溶剂对银杏叶及野生榛蘑的浸提效果,分析硒的溶解情况,为人体补硒提供借鉴和参考。   1 材料与方法   1.1 材料   银杏叶采自辽宁大学崇山校区(沈阳),野生榛蘑采自长白山。   光谱纯硒(Ⅳ)粉购于国家环保总局标准样品研究所,2,3-二氨基萘购于Acros Organics公司,优级纯盐酸和硝酸购于沈阳化学试剂厂,去离子水由实验室自制。   1.2 仪器   Cary Eclipse荧光分光光度计(美国VARIAN公司);ESJ120-4电子天平(沈阳龙腾电子称量仪器有限公司);红外快速干燥箱(沈阳市皇姑区长江五金机电厂);SHZ-2000型双配套循环水式多用真空泵(河南省巩义市英峪予华仪器厂);SYZ-B型石英亚沸高纯水蒸馏器(江苏金坛市宏华仪器厂)。   1.3 方法   1.3.1 硒标准储备液的配制 精确称取100.0 mg光谱纯硒粉,溶于少量硝酸中,加2 mL高氯酸,置沸水浴中加热3.5 h,冷却后加入8.4 mL盐酸,再沸水浴2 min,以0.1 mol/L盐酸稀释至1 L,此储备液Se(IV)浓度为100 μg/mL。   1.3.2 硒标准工作溶液的配制 将Se(Ⅳ)储备液用0.1 mol/L盐酸稀释,配制0.05 μg/mL硒溶液,于-4 ℃保存。   1.3.3 2,3-二氨基萘溶液的配制 称取100 mg 2,3-二氨基萘于带盖锥形瓶中,加入100 mL 0.1 mol/L盐酸,待溶解后振摇15 min。加20 mL环己烷,继续振摇,分液,收集下层溶液于棕色瓶中,然后加高度约为1 cm的环己烷覆盖表面,于-4 ℃保存。整个操作避光配制。   1.3.4 硒的工作曲线 准确吸取硒标准使用液 0.0、0.2、1.0、2.0、4.0 mL,加水至5 mL,再分别加入20 mL EDTA混合液,用6 mol/L盐酸调pH值至1.5~2.0。以下步骤在暗室进行:加入3 mL 2, 3-二氨基萘试剂,混匀,沸水浴5 min,取出立即流水冷却,然后加3 mL环己烷,振摇4 min,将全部溶液移入分液漏斗,待分层后弃去水层,有机相转入比色皿中,小心勿混入水滴,于λex=376 nm,λem=520 nm处测定苤硒脑的荧光强度。   1.3.5 样品测定 称取银杏叶粉末样品及榛蘑粉末样品各1 g,设3份平行,向其加入不同的浸提剂,分别于沸水浴中浸提不同时间,然后将浸提液抽滤,并参照1.3.4法测定硒含量,计算硒浸出率。   1.3.6 银杏叶和山榛蘑中硒的测定 分别准确称取1.000 0 g银杏叶粉和山榛蘑粉样品于磨口锥形瓶中,加10 mL浓硫酸,样品湿润后,再加20 mL混合酸(硝酸∶高氯酸=2∶1,V/V)放置过夜。次日于砂浴上逐渐加热,当激烈反应发生后(溶液变无色),继续加热至产生白烟,溶液逐渐变成淡黄色,消解反应完全,离心,取上清液,移入100 mL容量瓶中,加入0.1 mol/L HCl溶液定容。准确移取4.0 mL混合酸于磨口锥形瓶中,并加入20 mL EDTA混合液,用氨水溶液(浓氨水∶纯水=1∶1,V/V)调至淡红橙色。同时设一组空白对照,并参照1.3.4法测定,求出△F值。   1.3.7 银杏叶多糖和山榛蘑多糖中硒的测定 采用水煮醇沉方法制备银杏叶多

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