第三章微生物的代谢调节和代谢工程++.pptVIP

一、酶活性调节   第三章 微生物的代谢调节与代谢工程 1、共价修饰 指蛋白质分子中的一个或多个氨基酸残基与一化学基团共价连接或解开，使其活性改变的作用。 化学基团：磷酸基、腺苷酰基、甲基、乙基等 蛋白质的共价结合部位一般为丝氨酸残基的-CH2OH 共价修饰分可逆和不可逆两种 酶活性调节（continued） 酶可逆共价修饰的意义： 1） 因酶构型的转换是由酶催化的，故可在很短的时间内经信号启动，触发生成大量有活性的酶； 2）这种修饰作用可更易控制酶的活性以响应代谢环境的变化。  这一系统具有能随时响应的特性，因而经常在活化与钝化状态之间来回变换。  需消耗能量，但只占细胞整个能量消耗的一小部分 2、变构控制 变构或别构(allosterism)效应 是指一种小分子物质与一种蛋白质分子发生可逆的相互作用，导致这种蛋白质的构象发生改变，从而改变这种蛋白质与第三种分子的相互作用。  变构蛋白是表现变构效应的蛋白  具有变构作用的酶称作变构酶 酶活性调节（continued） 一）酶合成调节的类型 组成酶 不依赖于酶底物或类似物的存在而合成 如葡萄糖转化为丙酮酸过程中的各种酶 诱导酶 依赖于某种底物或底物的结构类似物的存在而合成 如大肠杆菌乳糖利用酶 1、酶合成的诱导（induction）  诱导剂可以是诱导酶的底物，也可是底物的结构类似物 如：乳糖是大肠杆菌-半乳糖苷酶合成的诱导剂，也是此酶的底物 [实际上乳糖不是真正的诱导物，它必须先转化为别乳糖才能起诱导剂的作用]  诱导剂也可以不是该酶的作用底物 如异丙基- -D-硫代半乳糖苷（IPTG）是-半乳糖苷酶合成的极佳诱导剂，但不是作用底物；  酶的作用底物不一定有诱导作用 如对硝基苯--L-阿拉伯糖苷是-半乳糖苷酶的底物，但不能诱导该酶的合成。 酶的诱导可分两种： 1）同时诱导 2）顺序诱导 当诱导物加入后，同时或几乎同时诱导几种酶的合成；主要存在于短的代谢途径中。 如将乳糖加入到E.coli培养基后，可同时诱导出-半乳糖苷透性酶、 -半乳糖苷酶、半乳糖苷转乙酰基酶；不管诱导强度如何，这三种蛋白以同一比例合成。 （因为三者的基因组成同一操纵子） 先合成能分解底物的酶，再依次合成分解各中间代谢物的酶，以达到对较复杂代谢途径的分段调节。 2、酶合成的阻遏(repression) 特点：细胞内产物积累到一定程度产生的反馈调节作用 1）反馈抑制该产物合成途径中前面某种酶的活性，属于酶活性调节 2）反馈阻遏某些酶的继续合成，属于酶合成调节 根据产物性质分为：末端产物阻遏和分解代谢产物阻遏 指由某代谢途径末端产物过量积累而引起的阻遏。 末端产物阻遏 (end-product repression) 如：甲硫氨酸的生物合成 在大肠杆菌培养基中含有甲硫氨酸，则检测不到同型丝氨酸转移酶、胱硫醚合成酶和同型半胱氨酸甲基化酶，而不含有甲硫氨酸，则可以检测到这些酶的活性，表明这些酶均受甲硫氨酸的阻遏。  末端产物阻遏在代谢调节中有重要作用，保证细胞内各种物质维持适当的浓度；普遍存在于氨基酸核苷酸生物合成途径中。 分解代谢物阻遏 (catabolite repression) ——是指两种碳源（或氮源）分解底物同时存在时，细胞利用快的那种分解底物会阻遏利用慢的底物的有关分解酶合成的现象。 or ——当培养基中同时存在有多种可供利用的底物时，某些酶的合成往往被容易利用的底物所阻遏，这就是分解代谢阻遏。  最典型的例子是细胞通过最易利用的碳源（如葡萄糖）的分解产物来抑制一些酶的合成。  这个现象最早在青霉素的生产中发现，可快速利用的葡萄糖致使青霉素产量特别低，而缓慢利用的乳糖却能较好地生产青霉素。  进一步的研究表明，乳糖并不是青霉素合成的特殊前体，它的价值仅在于缓慢利用。被快速利用的葡萄糖的分解产物阻遏了青霉素合成酶的合成。 把大肠杆菌培养在含有葡萄糖和乳糖的培养基中，可明显看到大肠杆菌经历了两个对数期。 葡萄糖在第一个周期中被利用。在葡萄糖代谢初期，-半乳糖苷酶和半乳糖苷透性酶的合成受阻遏，使乳糖不被利用。 葡萄糖被消耗完后，乳糖代谢所需的酶开始合成，于是出现了利用乳糖的第二个生长周期。  阻遏作用并非快速利用的碳源（或氮源）本身作用的结果；而是其分解代谢过程中所产生的中间代谢物引起；  这种抑制青霉素合成及乳糖利用的现象，起初认为只有葡萄糖才会产生，故称为葡萄糖效应。  所有可以迅速利用或代谢的能源，都能阻遏异化另一种被缓慢利用能源所需酶的合成  分解代谢阻遏涉及到的是一些诱导酶 二）酶合成调节的分子机制 目前认