组织干细胞识别谱系重编和示踪研究.docVIP

一、研究内容 按照重大科学研究计划评审专家对本项目的反馈意见与建议“建议项目集中在示踪技术的灵敏性和技术的扩展应用上，同时关注示踪的特异性lineage marker和功能鉴定标准”，我们将项目的研究内容进行了适当的调整，加大了第四课题的研究力度，扩展示踪技术的应用研究，在肝脏以及心脏组织干细胞中开展标记移植示踪的研究，同时缩减了第二课题中与本项目关联不大的部分研究内容（胚胎干细胞与ips细胞这部分内容），将内容集中在示踪技术的灵敏性和技术的扩展应用上，并关注示踪的特异性谱系标志物和功能鉴定。 围绕本项整合性研究干部分肝脏切除模型通过DNA甲基化及组蛋白乙酰化等分析，揭示不同类型先驱细胞专一性表达的转录因子群体，鉴定到数个在决定分化和转变细胞谱系中起关键作用的主调控基因，阐明其中的表观遗传调控机制。 4. 基于干细胞用于临床治疗应用的安全性及有效性，研究四个问题：1. 移植后的干细胞在哪里？2. 移植的干细胞是否能在体内存活？3. 移植的干细胞是否能和宿主整合发挥生理功能？4. 局部注射和静脉系统给予等不同的移植途径对干细胞组织功能重建有什么影响？具体内容包括：探索干细胞体外标记的新方法，研究不同移植途径对干细胞标记示踪的影响，核磁共振影像学结合波谱技术检测脑神经干细胞的研究，活体 二、预期目标 总体目标： 针对国家健康干细胞为整合性研究分子建立向功能细胞分化模型分子博士后从事基础研究的 三、研究方案 总体研究思路： 本项目围绕国家重大需求的关键科学问题，从不同胚层中选取具代表性的组织干细胞为研究对象，从分子、细胞和整体三个层面开展系统的研究项目研究的技术路线 可行性 本课题是在目前项目组学术骨干主要研究工作的基础上，经过分析该领域国内外研究现状后提出的，具有扎实的工作基础和理论基础，有较强的目的性和可行性。其他参与本课题的研究单位和学术骨干多年从事基础和临床研究，目前均取得了较大的进展，已经在各国际期刊发表了原创性成果，具有很坚实的前期工作基础；他们分子生物学、细胞生物学等方面的研究技术。课题组本身或所在单位业已建立了相关的研究体系和技术平台，技术方法全面，主要仪器设备齐全，这些还在不断发展和完善中，会对本项目的开展起积极推动作用。参与本项目的研究单位和学术队伍是有机自然组成的整体，包括国家重点实验室个，个，个，国家级技术平台个等多个优势单位，有丰富的科研经验。参加本项目的研究骨干组成结构合理，搭配得当，他们多是精力充沛的中青年研究工作者，是我国在本领域中的中坚力量；他们对科学研究，注重创新，能在本项目研究中取得进展和成绩。基于上述多种因素综合考量，本项目具备了取得重大突破的可行性。 整合多个学科的研究通过大家的共同努力，我们有理由相信中国这一领域的研究将国际同类研究的水平。创新点 Mn2+的化学性质离子半径与Ca2+似探索在活体水平同时观察移植神经干细胞定位和电生理功能的可能性分子 课题设置 课题1. 组织干细胞发育分化的模式生物研究及其分子指纹图谱的鉴定 研究内容：建立组织干细胞及其分化过程细胞谱系跟踪的模式生物技术方法，实现在活体内研究组织干细胞的起源、维持和分化，并在这一过程中研究组织干细胞的分子指纹图谱，为有效地掌握组织干细胞的形成和维持、为实现对细胞再编程的控制奠定理论基础，同时本课题也将成为支撑其他几个课题研究的一个通用平台。 研究目标：建立成熟的可在活体内示踪组织干细胞增殖分裂、迁移、分化和功能的各种转基因小鼠模型制备平台，获得组织干细胞的分子指纹图谱。 第一主要其它单位：复旦大学 其它单位研究人员：孙珊郑云伟郝传明干细胞内，追踪干细胞移植于内后的运动情况在脑内的。评估神经干细胞参与脑细胞电活动的功能重建探索在活体水平移植神经干细胞定位和功能的可能性分子 各课题间的相互关系，以及与项目总体目标和五年目标的关系本项目个课题之间具有密切联系，均是围绕设置的，力求达到彼此之间相互关联，以形成一个完整的研究体系。博士后从事基础研究的 四、年度计划 研究内容 预期目标 第 一 年 干 第 二 年 寻找干细胞特有的标记物干细胞内运动情况在体内的迁徙 获得Nestin、Islet??1，AFP、CD34等组织干细胞特异性标志基因的活体报告小鼠模型以及各自的Cre表达模型；获得神经干细胞与心脏干细胞的DNA甲基化图谱。获得肝干细胞分化的报告载体；获得启动肝细胞再生的关键极性蛋白；获得Rosa26 Stop-Lox-eGFP 和Albumin-Cre两种转基因小鼠，获得Rosa26 Stop Flox小鼠模型。阐明心脏干细胞的心肌再生能力以及内耳细胞的迁移分化能力，获得肾脏干细胞的鉴定标志，将诱导的全能干细胞诱导分化为脂肪干细胞。获得神经干细胞、肝脏干细胞经不同移植途径移植后的命运转化特点，从中筛选出干细胞移植的最佳