饲料掺假原料中蛋白氮的快速检测方法探讨.docVIP

饲料掺假原料中非蛋白氮的快速检测方法探讨 摘? 要：本文主要探究饲料掺假原料中主要几种非蛋白氮的快速定性检测方法，包括尿素、铵盐、硝酸盐-亚硝酸盐、尿醛聚合物、生物蛋白精、三聚氰胺的快速定性检测。快速定性检测方法在实际原料掺假检测工作中与其标准检测方法比较更简便、经济、实用、结果直观、选择性强，是一种实用性强、易推广的饲料掺假原料中非蛋白氮的检测方法。??? 关键词：非蛋白氮；尿素；铵盐；硝酸盐-亚硝酸盐；尿醛聚合物；生物蛋白精；三聚氰胺??? 饲料是发展畜牧业的物质基础，饲料中所含的营养物质及有害物质直接影响畜禽产品的质量，进而影响人类健康。近年来， 由于对原料的使用处理不当，二噁英、瘦肉精、苏丹红等由饲料安全问题引发的畜产品安全问题不断出现，已成为全球性关注的社会和政治问题，因而饲料原料的检验工序已是饲料生产中的重要程序。实验以大量的生产实践为基础，探究出更为实用、简便、快速、准确的测定饲料原料中非蛋白氮的检测方法，为以后饲料检测水平的改进提供理论依据。??? 1 检测方法???? 对部分样品进行脱脂，脱脂有两种方法，包括慢速脱脂和快速脱脂。??? 慢速脱脂：粗称取样品10g，把样品用滤纸包好，把滤纸包放入烧杯并加入石油醚，浸泡脱脂2～3h。然后取出滤纸包，将滤纸包放入通风橱中，把石油醚挥发干净。??? 快速脱脂：粗称取样品10g，把样品直接放入一个100mL小烧杯中，加30～40mL石油醚浸没样品，充分搅拌，浸泡萃取15min左右。然后把上清液倒掉，用滤纸过滤，收集脱脂样品。把脱脂样品放通风橱中，使石油醚挥发干净。??? 1.1 尿素、铵盐、硝酸盐-亚硝酸盐的快速定性检测??? 粗称2g上述脱脂样品于试管中，加10mL蒸馏水，用涡旋混合器混合10～15s，静置10min，取用上清液测非蛋白氮。??? 1.1.1 尿素的快速定性检测??? 尿素是一种白色、易潮解的结晶固体，纯尿素含氮量为46.6%（折合粗蛋白质含量291.3%）。这是最简单的非蛋白氮类化合物。是生产中使用范围最广、时间最长、用量最大的一种非蛋白氮。1kg尿素相当于2.88kg粗蛋白质，相当于7kg大豆饼。??? 快速检测尿素有两种方法。??? 第1种方法：先加6～8滴上清液到白色点滴板上，然后加2～3滴0.1%溴百里酚兰和4～5滴0.4%尿素酶到白色点滴板上，观察颜色变化情况。若为阳性反应结果呈蓝色，阳性最低检测限是0.25%。??? 第2种方法：取试样5g左右，置于一张干净的滤纸上，再加入5g左右的生豆粉，搅拌均匀，用蒸馏水润湿，滴入数滴甲酚红试剂，让其反应3～5min，若有尿素存在即显出红色，且散开得像蜘蛛网似的，无尿素则显出黄色。??? 1.1.2 铵盐快速定性检测??? 加6～8滴上清液到点滴板上，然后滴加2～3滴奈斯勒试剂，观察颜色变化结果。阳性反应的结果：开始为黄色，逐渐变为深桔色，一会就变灰色，若只出现深桔色、基本不变色或由黄色直接变为灰色或很快变为灰色，则是阴性。最低检测限是0.1%。??? 1.1.3 硝酸盐-亚硝酸盐的快速定性检测??? 加6～8滴上清液到点滴板上，然后加2～3滴0.5%二苯胺，观察颜色变化结果。阳性反应的结果：在点滴板中间是深蓝色，最低检测限是0.05%。??? 1.2 脲醛聚合物的快速定性检测??? 快速检测脲醛聚合物有两种方法。??? 第1种方法适用范围：动物性原料和植物性原料??? 动物性原料脱脂（植物性原料不用脱脂）， 样品过45目筛， 加6～8滴0.5%变色酸到点滴板上， 取一些筛下样品也加到点滴板上，往点滴板上再加0.5%变色酸，观察颜色变化结果。阳性反应的结果：在5～10min内，出现蓝紫色，最低检测限是0.15%。??? 第2种方法适用范围：仅动物性原料??? 称3g样品加到50mL带盖离心管中，加35mL煮沸的20% NaOH溶液，用涡旋混合器混匀，静置大约5min，倒掉上清液，留下底部沉淀，加35mL蒸馏水，混合，静置5min，倒掉上清液，反复洗3～4次，洗到沉淀无色（白到灰色），用蒸馏水将沉淀转移到10mL的试管中，吸出试管内大部分水，仅留1cm高的水。加1mL 0.5%变色酸，混匀，再观察颜色。阳性反应的结果：蓝紫色，最低检测限是0.25%。??? 1.3 生物蛋白精的快速定性检测??? 蛋白精又叫蛋白胨，是一种脲醛树脂聚合物（CO（NH2）2+CH2O），主要用于工业生产。生物蛋白精的最大特点是含氮量高（可达66%）、价格低。在饲料中少量掺入就可以迅速提高其“蛋白”含量。如果在饲料中，每增加1个百分点的生物蛋白精，会使用“凯氏定氮法”测定的表观粗蛋白质虚涨4个以上的百分点。生物蛋白精添加到饲料中，由于其本身没有任何营养价值，不能被动物所吸收