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糖类的测定 兰-埃农法测定还原糖 糖类又称碳水化合物，是生物界三大基础物质之一。 总碳水化合物分为两大类： 有效碳水化合物：单糖、双糖、糊精、淀粉和糖原（动物性淀粉）。 无效碳水化合物：天然存在的纤维素、半纤维素、木质素、果胶以及加入食物中的微量多糖。 还原糖的测定 还原糖最常用的提取方法是温水（40~50℃）提取，而板栗、豆类及干燥植物样品一般采用乙醇溶液[￠（乙醇）=75﹪~85﹪] 常用的澄清剂： 中性醋酸铅溶液 醋酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液 碱性硫酸铜溶液 活性炭 另外，还有碱性醋酸铅、钨酸钠等。 澄清剂的选择根据提取液的性质、干扰物质的种类与含量以及采取的测定方法。 原则：能够完全除去干扰物质，但不会吸附糖类，也不会改变糖液的性质 糖类的测定 化学法 还原糖的测定方法：比色法、旋光法、比重法、滴定分析法等。 兰-埃农法： 反应原理： CuSO4+2NaOH→Cu(OH)+Na2SO4 ∕OH HO—CHOONa ∕O–CHOONa Cu + ︱ →Cu ︱ +2H2O ﹨OH HO—CHOOK ﹨O–CHCOOK 酒石酸钾钠铜 （深蓝色） ∥O 2B+RC +2H2O→Cu2O↓+2A+RCOOH ﹨H 还原糖 氧化亚铜（砖红色） 试剂 （1）费林甲液：称取34.639gCuSO4·5H2O，加适量水溶解，加0.5mL硫酸，用水稀释至500mL，用精制石棉过滤。 （2）费林乙液：称取173g酒石酸钾钠和50g氢氧化钠于适量水中溶解，用水稀释至500mL，用精制石棉过滤。 （3）精制石棉 （4）亚甲蓝（次甲基蓝）指示剂：10g·L-1，水溶液 （5）标准葡萄糖溶液 （6）澄清剂 操作方法 样品处理 测定 标定费林试液 每10mL费林试液相当于还原糖的量f（mg）：f=5V0 粗滴定、精密滴定 计算 X=（f×250／mV×1000）×100 X—样品中还原糖的质量分数，%[或质量浓度，g·（100mL）-1 计算 X=（f×250／mV×1000）×100 X——样品中还原糖的质量分数，%[或质量浓度，（g·100mL）-1]； F——还原糖因素，即与10mL费林试液相当的还原糖量,mg 250——样品处理后的总体积，； V——样品试液滴定量， mL； m——样品质量（或体积），g（或mL） 注意事项 测定时必须严格按照操作规程进行，并力求平行测定条件一致。 整个滴定过程必须在沸腾的溶液中进行，液面覆盖着水蒸气，以避免亚甲蓝与空气接触。 若溶液煮沸后不呈蓝色，表明液中含糖量过高，可减少样品量重做。 单糖在碱性条件下不稳定，易发生异构化和分解反应，因此调整果蔬样品提取液的酸度时，若加入碱溶液过量，应立即用盐酸回调至微酸性。 糖提取液应除尽蛋白质 含脂肪高的样品，可先用乙醚或石油醚处理几次，脱脂后再用水提取。 费林甲液、乙液需分开储存，使用时再等量混合，以免酒石酸钾钠络合物在碱性条件下慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使有效浓度降低。 * * * * * * 离子色谱法 单糖和低聚糖 色谱法：纸色谱法、薄层色谱法、 酶法 相对密度法 折光法 旋光法 还原糖法（斐林氏法、高锰酸钾法、铁氰化钾法） 碘量法 缩合反应法 多 糖 淀粉：水解为单糖，再用单糖测定方法测定 果胶和纤维素：多采用重量法 物理法 干果类样品 乳及乳制品、 含蛋白质 的冷食类 酒精性饮料 汽水等二 氧化碳饮料 新鲜果蔬样品 样品 * *