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从毛发中提取胱氨酸工艺研究 　　摘 要：本文研究的是从毛发中提取胱氨酸，即以头发为原料，盐酸为水解液，水解提取胱氨酸。分别研究了提取温度、pH值、时间等条件对胱氨酸收率的影响。结果表明，影响毛发中提取胱氨酸含量的主要因素为提取温度，其次为提取时间、pH值和加碱速度等。实验表明最佳的提取工艺条件为提取温度为115℃，pH值为4.8，提取时间为8个小时，加碱速度为4mL/min。在这个工艺条件下的产量为6.19g。 　　关键词：毛发 胱氨酸 提取 水解条件 产率 　　一、简介 　　胱氨酸，即L-胱氨酸，1810年由Wollaston从膀胱结石中发现，1832年，Berzelius将其命名为胱氨酸，学名为双-β-硫代-α-氨基丙酸，分子式为C6H12N2O4S2，分子量为240.3，呈白色六角形板状结晶或者白色结晶粉末，熔点258-261℃，溶于稀酸和碱溶液，极难溶于水，不溶于乙醇。胱氨酸的常用生产方法主要有发酵法、合成法和水解法。而胱氨酸???毛发中约有14%的含量，因此，我国主要利用毛发天然蛋白资源为原料，采用酸水解法生产制备胱氨酸。其优点：水解彻底，水解终产物为L-氨基酸，无旋光异构体产生。而从蛋白质水解液中分离个别氨基酸，通常可用柱层析、薄纸层析，以及电泳等方法。多采用等电点沉淀法. 　　二、反应原理 　　毛发是一种角蛋白，强酸可破坏其内部结构，将其水解。本实验中将毛发用适当浓度的盐酸进行水解，控制水解时间，反应温度等其它反应条件，用碱调节溶液的pH至胱氨酸的等电点，此时，由于静电引力的作用，彼此聚集，溶解度最小，沉淀最容易析出。 　　1.试剂与仪器 　　1.1试剂 　　毛发，30%的工业盐酸，3%盐酸，30%氢氧化钠溶液，10%氢氧化钠溶液，氨水，活性炭，蒸馏水。分别产自洛阳市化学试剂厂，上海振欣试剂厂，北京化工厂，安徽安特生物化学有限公司和实验室制备。 　　1.2仪器 　　采用pHS-3C型精密酸度计，产自上海大普仪器有限公司；FA1104型电子天平，产自上海良平仪器有限公司；智能恒温电热套，产自郑州长城科工贸易有限公司；DZF-6050型真空干燥箱，产自上海博迅实业有限公司医疗设备厂；循环水式多用真空泵，产自昆山市超声仪器有限公司；各种玻璃仪器，产自宁波市化学有限公司。 　　2.水解过程 　　选用盐酸作为人发的水解液，以碱中和、沉淀，活性炭作为脱色剂，再用重结晶的方法提纯粗品。流程如下：毛发→清洗（脱脂）→酸水解→过滤→碱中和结晶→过滤→胱氨酸粗品（Ⅰ）→酸溶解→一次脱色→过滤→滤液→碱中和结晶→过滤→胱氨酸粗品（Ⅱ）→酸溶→二次脱色→过滤→滤液→碱中和结晶→过滤→洗涤干燥→胱氨酸精品 　　3.实验步骤 　　3.1头发的预处理： 　　将头发用水洗3—4次，直至洗净，然后晒干。 　　3.2水解： 　　安装一套带电动搅拌、测温仪的回流装置，按毛发与工业盐酸质量比为1：2（100g：200g）的比例装入500毫升三颈烧瓶中，装上回流冷凝器。预先加热并调节电热套温度达190℃左右，在20min内将烧瓶内物质加热到115℃左右。待毛发全溶解后，恒温加热，并控制温度在115℃，用电动搅拌7-10h。静置，抽滤。 　　3.3中和： 　　将以上过滤好的滤液在搅拌下加入30%NaOH溶液，当中和到pH达到4.0时，停止加碱液，然后改用氨水中和到pH为4.8左右，停止搅拌，静置12小时以上，使胱氨酸沉淀完全。抽滤、水洗二次得灰棕色粗胱氨酸。 　　3.4纯化： 　　将粗胱氨酸置于500mL圆底烧瓶中，加入200mL3%HCI使之溶解，并加入10克活性炭，装上冷凝器，回流煮沸20分钟。然后脱色液过滤，水洗残渣二次，得无色澄清滤液。若滤液颜色尚深，需再用4克活性炭处理直至无色为止。滤液倒入500mL烧杯中，在搅拌下加10%NaOH溶液，调pH至4.0时，停止加碱液，然后改用氨水中和到pH至4.8左右，静置3天，使结晶沉淀完全。抽滤、沉淀用热水洗二次，抽干后，放在烘箱内烘干（保持温度在60℃左右）或真空干燥，即得产品约5～7克。 　　三、结果与讨论 　　1.实验结果分析 　　1.1 提取温度对胱氨酸收率的影响 　　固定毛发与盐酸比例（100g：200g）及pH=4.8、提取时间8小时、加碱速度4mL/min等结果如下：提取温度为115℃的时候胱氨酸的收率为最大。随着温度升高，产率逐渐地升高，当温度超过115℃后，产率逐渐降低。随着温度的升高，水解液中胱氨酸的水解率也在升高，同时会增加胱氨酸分解的破坏程度，导致产率降低，随着温度的升高，盐酸挥发的速度也会加快，所以这个也是导致产率降低的原因。 　　1.2 提取时间对胱氨酸收率的影响 　　改变提取时间来得出胱氨酸的收率，提取时间对胱氨酸收率的影