分子生物学 16 考研笔记 中山大学.ppt

六、翻译 1. 起始（initiation） （1）原核生物的翻译起始 tRNA装载（tRNA charging） 在氨酰tRNA合成酶（aminoacyl-tRNA synthetase）的作用下，使氨基酸连接到tRNA 3’端的腺苷酸上，形成氨酰tRNA（aminoacyl-tRNA） Aminoacyl-tRNA synthetase activity 六、翻译 1. 起始（initiation） （1）原核生物的翻译起始 tRNA识别（tRNA identity） 氨酰tRNA合成酶的专一性很高，共有20种，每一种只用于单一种氨基酸与相应tRNA的结合 tRNA上的某些结构特征能使它在氨酰tRNA合成酶的催化下，与特定的氨基酸结合；这些结构特征就是“第二遗传密码”（the second genetic code） 六、翻译 1. 起始（initiation） （1）原核生物的翻译起始 tRNA识别（tRNA identity） “第二遗传密码”常在tRNA的受体茎（acceptor stem）上，但在其他区域的也有不少 “第二遗传密码”较复杂，且是非简并的，但专一性同样很强 Identity elements in various tRNA molecules 六、翻译 1. 起始（initiation） （1）原核生物的翻译起始 核糖体解离（dissociation of ribosomes） 翻译起始复合物首先是在核糖体小亚基上组装起来 每一次翻译后，核糖体的大小亚基必须解离，以让新的翻译起始复合物形成 核糖体解离需要起始因子（initiation factors，IF）的协助 Summary of prokaryotic translation initiation 六、翻译 1. 起始（initiation） （1）原核生物的翻译起始 30S起始复合物的形成 由核糖体小亚基（30S）、mRNA、氨酰tRNA及起始因子等构成 Summary of prokaryotic translation initiation 六、翻译 1. 起始（initiation） （1）原核生物的翻译起始 起始tRNA 携带甲酰甲硫氨酸的tRNA（tRNA ），识别密码子AUG、GUG和UUG tRNA 与携带甲硫氨酸到蛋白质链内部的tRNA（tRNA ）稍有不同，后者只识别AUG 六、翻译 1. 起始（initiation） （1）原核生物的翻译起始 mRNA与核糖体小亚基的结合 在起始密码子的上游（数个核苷酸），有一共同序列AGGAGGU，与16S rRNA 3’端的序列（3’ HO-AUUCCUCCAC 5’）互补配对，是核糖体的结合位点；这一序列又称SD序列（Shine-Dalgarno sequence） mRNA与核糖体小亚基的结合还需要有起始因子的协助：IF-3最重要，IF-1和IF-2也起一定的作用 六、翻译 1. 起始（initiation） （1）原核生物的翻译起始 甲酰甲硫氨酰tRNA（fMet-tRNA ）与30S起始复合物的结合 主要由IF-2负责，IF-1和IF-3辅助，此外还需要GTP（GTP的作用是使IF-2能顺利地结合到核糖体小亚基上） 六、翻译 1. 起始（initiation） （1）原核生物的翻译起始 70S起始复合物的形成 30S起始复合物加上核糖体大亚基（50S），就形成70S起始复合物 在这一过程中，IF-1和IF-3先从复合物中解离，接着IF-2解离，同时GTP水解成GDP和磷酸（促进IF-2解离） IF-2的解离是形成具活性的70S复合物所必需的 Summary of prokaryotic translation initiation 六、翻译 1. 起始（initiation） （2）真核生物的翻译起始 与原核生物的翻译起始的差异 起始氨基酸不是甲酰甲硫氨酸，而是甲硫氨酸；起始tRNA则为tRNA 真核mRNA不含SD序列，但有5’帽子，有助于起始复合体的形成 通过扫描寻找起始密码子 六、翻译 1. 起始（initiation） （2）真核生物的翻译起始 扫描（scanning） 核糖体小亚基（真核生物为40S）与起始因子、起始tRNA及其携带的氨基酸（甲硫氨酰tRNA，Met-tRNA ）、GTP一道，通过识别mRNA 5’端的帽子（7-甲基鸟苷），结合到mRNA的5’端，然后从5’ 3’扫描，寻找起始密码子 找到起始密码子后，再加上核糖体大亚基，就可开始翻译 A simplified version of the scanning model for translation init