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创新大课堂2016届高三生物(人教版)一轮复习课件选修1 第4讲DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取_1
答案 (1)磷酸基团 3′端 (2)耐高温的Taq DNA聚合酶 选择培养基 (3)变性、复性和延伸 32 (4)如图所示 (5)遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定(要求3项以上) 考情三 血红蛋白的提取和分离 5.以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是( ) A.洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂 B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少 C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测 D.在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢 解析 猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少,是提纯血红蛋白的理想材料。提纯血红蛋白分四步:红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析,其中洗涤红细胞时,要用生理盐水反复洗涤,既要将红细胞洗涤干净,又要不破坏红细胞,然后再用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂,释放出血红蛋白。分离提纯血红蛋白时用凝胶色谱法,其原理是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质,相对分子质量大的蛋白质移动速率较快;血红蛋白的颜色可用于观察红色区带的移动情况,并据此判断分离效果。 答案 D 根据三原色原理叠加后的单色形成了第三种颜色并脱离了原本的单色颜色更加丰富象征着产品在原有空间的组合中产生了突破性的变化 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 根据三原色原理叠加后的单色形成了第三种颜色并脱离了原本的单色颜色更加丰富象征着产品在原有空间的组合中产生了突破性的变化 根据三原色原理叠加后的单色形成了第三种颜色并脱离了原本的单色颜色更加丰富象征着产品在原有空间的组合中产生了突破性的变化 根据三原色原理叠加后的单色形成了第三种颜色并脱离了原本的单色颜色更加丰富象征着产品在原有空间的组合中产生了突破性的变化 选修一 生物技术实践专题 第四讲 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取 考点·全线突破 考点一 DNA的粗提取与分离 [关键点击] 1.DNA与蛋白质在NaCl溶液中溶解度 2 mol/L NaCl溶液 0.14 mol/L NaCl溶液 溶解规律 在酒精溶液中的溶解性 对高温的耐受性 D N A 溶解 析出 析出 80 ℃以上才会变性 蛋白质 部分发生盐析沉淀 溶解 NaCl溶液从2 mol/L降低 过程中,溶解 度逐渐增大 溶解 不能忍受60 ℃~80 ℃ 的高温 2.鉴定方法 (1)DNA与二苯胺在沸水浴条件下反应呈蓝色; (2)蛋白质与双缩脲试剂常温下反应呈紫色。 3.DNA粗提取实验材料和方法的选择 (1)不同生物的组织中DNA含量不同 在选取材料时,应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。 (2)材料不同所采用的提取方法不同 ①植物组织:取材→研磨→过滤→沉淀。 ②鸡血:制备鸡血细胞液→提取核DNA→溶解细胞核内DNA→析出并滤取DNA→DNA再溶解→提取较纯净的DNA。 4.DNA粗提取实验中注意的问题 (1)DNA的粗提取的关键:提取DNA时DNA和蛋白质的溶解与析出是相反的,实验时一定要明确DNA分子的去向,防止误将DNA分子丢弃。 (2)2次加蒸馏水的作用:①加入鸡血细胞液,使血细胞吸水涨破;②加入含DNA的2 mol/L NaCl溶液,使其稀释,从而析出DNA。 (3)3次使用纱布的作用:①过滤血细胞破裂液,提取细胞核物质(DNA在滤液中);②过滤0.14 mol/L NaCl溶液,滤出DNA(DNA在黏稠物中);③过滤溶有DNA的2 mol/L NaCl溶液(DNA在滤液中)。 (4)3次使用NaCl溶液的作用:①2 mol/L NaCl溶液,溶解提取细胞核物质;②0.14 mol/L NaCl溶液,使DNA析出;③2 mol/L NaCl溶液,溶解滤取的DNA黏稠物。 考点二 PCR技术的基本操作和应用 [关键点击] 1.PCR相关技术原理与条件 (1)PCR:多聚酶链式反应的简称,是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。 (2)引物:是一小段RNA或单链DNA,它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对。 (3)扩增方向:DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。 2.细胞内DNA复制与PCR技术 细胞内DNA复制 PCR 不同点 解旋 在DNA解旋酶作用下,边解旋边复制 80~100 ℃高温解旋,双链完全分开 酶 DNA解旋酶、DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶 引物 RNA DNA或RNA 温度 体内温和条件 高温 循环 受生物自身控制 30多次 相同点 ①需提供DNA复制的模板;②四种脱氧核苷酸为原料; ③子链延伸的方向都是从5′端到3′端 3.PCR的反应过程 (1)变性:当温度上升到90 ℃以上时,双链DNA解聚为单链,如下图: (2)复性:温度下降到50 ℃左右,两种引
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