毛细管电泳法测定头孢羟氨苄胶囊中头孢羟氨苄含量.docVIP

毛细管电泳法测定头孢羟氨苄胶囊中头孢羟氨苄含量 　　[摘要] 目的 建立头孢羟氨苄胶囊中头孢羟氨苄的含量测定方法。方法 采用毛细管电泳法，以盐酸班布特罗为内标，熔融石英毛细管柱（50 cm×75 m，有效长度37 cm）为分离通道，50mmol/L磷酸盐缓冲液（pH5.0）为运行缓冲液，工作电压25kV，电压进样10kV×5s，柱温25℃，检测波长230 nm。结果 头孢羟氨苄浓度在0.5-3.0mg/L范围内线性关系良好（r=0.9996，n=6），平均加样回收率为99.04%，RSD为1.55%。结论 本法简便、准确、快速，适用于头孢羟氨苄胶囊中头孢羟氨苄的含量测定。 　　[关键词] 头孢羟氨苄胶囊；毛细管电泳法；含量测定 　　[中图分类号] R96 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2013）05（a）-0119-02 　　头孢羟氨苄为第一代口服头孢菌素，临床上主要用于治疗敏感菌所致的尿路感染，呼吸道感染，皮肤软组织感染和中耳炎等。毛细管电泳具有操作简便，分离效率高和易于自动化等优点，被广泛应用于抗生素的分析研究中。有文献报道采用近红外光谱法[1]、分光光度法[2]、导数光谱法[3]和高效液相色谱法[3-6]测定头孢羟氨苄，目前尚未见采用毛细管电泳分析头孢羟氨苄的报道。该研究通过对影响毛细管电泳分离因素的考察，建立测定头孢羟氨苄胶囊中头孢羟氨苄含量的毛细管电泳法。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　P/ACE MDQ毛细管电泳仪，二极管阵列检测器，熔融石英毛细管柱（50cm×75 m，有效长度37cm），超纯水器，BP211D1/10万天平，pHS-3C pH计。 　　1.2 试剂 　　头孢羟氨苄对照品（纯度95.0%），内标盐酸班布特罗对照品（批号200705C01），头孢羟氨苄胶囊（规格250 mg/粒），水为超纯水，其它试剂均为分析纯。 　　2 实验方法 　　2.1 溶液的配制 　　2.1.1 内标溶液的配制 精密称取班布特罗适量，置于100 mL容量瓶，加水溶解并稀释至刻度，即得浓度为10.0 mg/mL的内标溶液。 　　2.1.2 对照品溶液的配制 精密称取头孢羟氨苄对照品适量，置于50 mL容量瓶，加水溶解并稀释至刻度，即得浓度为10.0 mg/mL的对照品溶液。 　　2.1.3 样品溶液的配制 取20粒头孢羟氨苄胶囊内容物共3批，精密称定，研细，分别称取3份相当于各自平均片重的量置于100 mL容???瓶中，加水充分溶解后用水稀释至刻度，摇匀，用0.45 m滤膜过滤，取续滤液即得样品溶液。 　　2.2 电泳条件 　　熔融石英毛细管柱：50 cm×75 m，有效长度37 cm；运行缓冲液：50mmol/L磷酸盐缓冲液（pH值5.0）；工作电压：25 kV；电压进样：10 kV×5 s；柱温25℃；检测波长230 nm；毛细管在每次运行前用0.1 mol/L氢氧化钠溶液、超纯水各冲洗5 min，运行缓冲液冲洗10 min，在2次运行之间用缓冲液冲洗3 min。 　　3 结果 　　3.1 头孢羟氨苄对照品及内标 　　（A）和样品中头孢羟氨苄及内标（B）的CE图，见图1。 　　3.2 线性试验 　　精密量取适量的对照品溶液和内标溶液，分别置10 mL容量瓶中，加水稀释成含内标物浓度为0.5mg/mL，对照品浓度分别为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mg/mL的溶液。按优化后的电泳条件进样，以对照品浓度（X）为横坐标，对照品与内标物峰面积的比值（Y）为纵坐标，进行线性回归，得回归方程：Y=11.363X-0.0206，r=0.9996。结果表明，头孢羟氨苄浓度在0.5～3.0 mg/mL范围内线性关系良好。 　　3.3 精密度试验 　　取3.0mg/mL对照品溶液，按优化后的电泳条件重复进样6次，头孢羟氨苄对照品与内标班布特罗峰面积比的RSD为1.12%，头孢羟氨苄对照品迁移时间的RSD为0.89%，班布特罗迁移时间的RSD为0.93%。 　　3.4 加样回收率试验 　　取20粒已知含量的头孢羟氨苄胶囊内容物，研细，精密称取相当于头孢羟氨苄125 mg的粉末9份，分别精密加入头孢羟氨苄对照品适量，内标溶液5.0 mL，置于100 mL容量瓶中，加水充分溶解后用水稀释至刻度，摇匀，用0.45 m滤膜过滤，取续滤液，按优化后的电泳条件进样，结果见表1。 　　3.5 样品测定 　　精密量取内标溶液0.5 mL，置于10 mL容量瓶，加样品溶液至刻度，按优化后的电泳条件进样，按回归方程计算含量，结果见表2。 　　4 讨论 　　4.1 检测波长的选择 　　应用二极管阵列检测器对头孢羟氨苄和内标班布特罗进行扫描，发现头孢羟氨