姜黄素长循环脂质体制备及药动学研究.docVIP

姜黄素长循环脂质体制备及药动学研究 　　[摘要] 姜黄素具有抗炎、抗氧化、降血脂和抗肿瘤等多重药理作用，但其水溶性差、体内消除快，半衰期短的缺陷使其临床应用受到限制。将姜黄素制备成长循环脂质体（Cur-LCL）可望改善其水溶性差的问题并有效延长其体内循环时间。该研究以乙醇注入法制备Cur-LCL，考察其理化性质，并以姜黄素原料药（Cur）和姜黄素普通脂质体（Cur-Lips）为对照组，通过体外释放和大鼠尾静脉注射给药后药动学行为考察Cur-LCL的长循环作用。结果表明所制备的Cur-LCL呈类圆形，粒径分布均匀，平均粒径110 nm，Zeta电位-5.8 mV，包封率和载药量分别为80.25%，2.06%；体外释放结果显示Cur-LCL在7，24 h内累积释放率分别达到48.95%，88.92%，与Cur和Cur-Lips相比具有明显缓释特征；大鼠尾静脉注射给药后的药动学研究表明，与Cur和Cur-Lips相比，Cur-LCL的AUC显著增大（P 　　[关键词] 姜黄素；长循环脂质体；体外释放；药动学 　　姜黄素（curcumin， Cur）是从姜科姜黄属Curcuma植物姜黄、莪术、郁金等中药的根茎中提取的一种小分子多酚类物质，具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎、保肝等多种药理作用[1]。姜黄素水溶性差，易降解，体内代谢迅速，半衰期短，临床应用有限[2]。脂质体作为一种新型药物载体，常被用来包载水溶性差的药物以改善溶解度的问题[3-4]，但普通脂质体易被网状内皮系统（reticuloendothelial system， RES）吞噬而被快速清除。而聚乙二醇（PEG）化脂质体由于PEG亲水链在脂质体外层的覆盖增强了脂质体的亲水性，并在脂质体表面形成空间位阻，可减少血浆蛋白与脂质体膜的相互作用，避免RES的识别与捕获，从而减缓体内清除速率延长其在循环系统的滞留时间[5]。故针对姜黄素水溶性差，体内消除迅速，半衰期短的缺陷，本实验制备了姜黄素长循环脂质体（curcumin-loaded long-circulating liposomes，Cur-LCL），并通过体外释放及体内药动学行为考察其长循环作用。 　　1材料 　　CP225D电子天平（德国赛多利斯公司）；Agilent 1200高效液相色谱仪（美国Agilent公司）；pH酸度计（瑞士Mettler-Toledo公司）；Labconco冷冻干燥机（美国Labconco公司）；Nano-ZS型粒径分析仪（英国Malvern公司）；JEM-1200EX透射电子显微镜（日本JEOL公司）；Mill-Q超纯水器（美国Millpore公司）；TGL-16B高速台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；HJ-6B多头磁力加热搅拌机（金坛市金伟实验仪器厂）；旋涡混合器（海门市其林贝尔仪器制造有限公司）；透析袋（美国Viskase公司，截留相对分子质量7 000 Da）。 　　姜黄素原料药（成都普思生物技术有限公司，纯度98%，批；姜黄素对照品（中国食品药品检定研究院，纯度98.8%，批号110823-201004）；大黄素对照品（中国食品药品检定研究院，纯度98.8%，批号110756-200110）；大豆卵磷脂（注射级，上海太伟药业有限公司，批；胆固醇（日本精细化工，批号B11223）；PEG2000-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺（PEG2000-DSPE，日本精细化工，批号B11218）；甲醇（色谱纯，Honeywell BurdickJackson公司，批；其他试剂均为国产分析纯。 　　清洁级SD大鼠，雌雄各半，体重（200±10） g，浙江中医药大学实验动物中心提供，合格证号SCXK浙2008-0016。所有动物实验均按照浙江大学动物饲养和使用指南进行。 　　2方法 　　2.1脂质体的制备 　　2.1.1姜黄素长循环脂质体的制备 采用乙醇注入法。精密称取姜黄素原料药3.0 mg，大豆卵磷脂100.0 mg，胆固醇10.0 mg，PEG2000-DSPE 5.0 mg溶于2.0 mL乙醇作为有机相，pH 6.5的磷酸盐缓冲液作为水相，在1 200 r·min-1的搅拌转速下，将有机相匀速缓慢滴入50 ℃保温水相中，滴毕，继续搅拌2 h，挥除有机溶剂，得Cur-LCL。 　　2.1.2姜黄素普通脂质体的制备 除不加入PEG2000-DSPE外，姜黄素普通脂质体（curcumin liposomes， Cur-Lips）的制备均与2.1.1项下方法相同。 　　2.2形态、粒径和Zeta电位 　　取适量Cur-LCL混悬液滴于铜网上，静置10 min后用滤纸片吸干，再滴加2.0%磷钨酸溶液于铜网上负染1 min，自然挥干，用