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- 2018-09-30 发布于天津
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多糖多酚植物总RNA快速提取试剂盒-深圳中联生物科技开发有限
深圳市中联生物科技开发有限公司
ZL Biotech Corporation
地 址:深圳市南山区桃源街道留仙大道1183号南山云谷创新产业园综合服务楼506-508
电 话:0755传真:0755-8655 0193
网 址:
一般实验室使用,仅用于体外
多糖多酚植物总RNA快速提取试剂盒 (离心柱型)
用于快速提取多糖多酚植物高纯度总RNA
目录号:RP3201(20次) RP3202(50次)
使用手册
2006年11月,第1版
深圳市中联生物科技开发有限公司
ZL Biotech Corporation
一、试剂盒组成、储存、稳定性
试剂盒组成 保存 20 次(RP1201) 50 次(RP1202) 裂解液 RL 4℃避光 25 ml 55 ml 沉淀剂 A 室温 2 ml 4 ml 去蛋白液 RE 室温 15ml 30ml 漂洗液 RW 4℃(一个月)-20℃(长期) 6 ml 15 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇 RNase-free H2O 室温 5 ml 10ml 70%乙醇 室温 4ml RNase-free H2 O 9ml RNase-free H2 O 第一次使用前按说明加指定量乙醇 RNase-free 室温 20 个 50 个 吸附柱 RA 收集管(2ml) 室温 20 个 50 个
本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。
注意事项
1. 第一次使用前请先在漂洗液 RW 瓶和 70%乙醇瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时 打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2. 所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使 用,可在 37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。
3. 不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输 和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。裂解液 RL 可以常温运输,收到后 4℃避光
保存。
4. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化,各溶液使用后应及时盖 紧盖子。
六、疑难解答(Trouble shooting)
出现的问题 可能的原因 建议解决方法 RNA产量低 样品裂解或者匀浆不彻底 液氮研磨的时候尽量研磨完全, 加入裂解液 RL 后剧烈震荡或者 用枪头吹打帮助裂解。匀浆步骤 可以提高产量。新鲜组织或者植 物组织可以不需液氮,SK 在干 净研钵内加入适量裂解液 RL 直 接研磨。 使用的样品或者裂解物在 存放时间过长可能降低 RNA 产 -20℃或者-70℃存放太 量,应尽快的处理样品或者裂解 久 物。 组织本身含 RNA 少 不同类型的组织和细胞含有不同 量的 RNA,对于含量少的组织应 该适当提高起始处理量。 超过了吸附柱的最大吸附 同一个样品使用多个吸附柱,然 能力 后合并得到 RNA。 去蛋白液 RE 和漂洗液 第一次实验时,漂洗液 RW 瓶和 RW 内忘记加乙醇 70%乙醇瓶中加入指定量无水乙 醇。 OD260 /OD280 吸光度比 分光光度计检测吸光度 检测时用 TE 稀释样品 值1.6 时,RNA 样品不是溶于 TE,而是溶于水。低离子 浓 度 和 低 pH 条 件 下 , OD280 值会较高,造成比 值低。
-1- -6-
接前表
出现的问题 可能的原因 建议解决方法 污染了蛋白或者苯酚 做步骤 5 吸取取上清水相的时候小 心不要吸取到中间相和下层有机相, 确保做了步骤 8。 基因组DNA污染 起始样品量超出了裂解液 选择合适的起始处理量。 RL 的处理范围 样品中含有有机溶剂(如 避免这些可以改变裂解液 RL 性质 乙醇,DMSO 等),强缓 或者 PH 值的物质。 冲液或碱性溶液。 做步骤 5 吸取取上清水相的时候小 吸取上清时吸入了中间相 心不要吸取到中间相。 RNA降解,完整性不 RNA 提取所用各种物品 按照注意事项准备 RNA 提取的各种 佳 和试剂没有灭活 RNA 酶 用品。 组织取出后没有马上处理 组织应该尽量立刻处理,不能及时处 或冷冻,提取前已经降解 理的应该尽快保存于液氮或者- 70℃。 提取的 RNA 样品没有保
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