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1.吸收光谱曲线：将不同波长的单色光依次通过固定浓度的被测溶液，用分光光度计测量每一波长下相对应光的吸收强度（吸光度），以波长（λ）为横坐标，以吸光度（A）为纵坐标作图，可得一条曲线。 2.紫外—可见分光光度计的结构：光源、分光器、吸收池、检测器、记录器 3.紫外—可见光吸收光谱评定的依据是：蓝波比尔定律。 4.比尔吸收定律的使用条件：①样品溶液因素：比尔定律通常只有在稀溶液时才能成立，随着溶液浓度增大，吸光质点之间距离缩小，彼此间相互影响和相互作用加强，破坏了吸光度与浓度之间的线性关系。②仪器因素：比尔定律只适用于单色光，但是经仪器狭缝投射到被测溶液的光，并不能保证理论要求的单色光，这也是造成偏离比尔定律的一个重要因素。 5.可见分光光度计的光源是钨灯，紫外分光光度计的光源是氘灯。 6.分光器（单色器）的作用：从连续光谱中分离出所需要的足够窄波段的光束，它是分光光度计的核心部件，其性能直接影响光谱的宽度，从而影响测定的灵敏度、选择性和标准曲线的线性范围。 7.最大荧光发射波长（λem）：若保持激发光波长为其最大激发波长，然后测定不同发射波长时的荧光强度，即得荧光发射光谱曲线，其荧光强度最大的波长即为物质的最大荧光发射波长。 8.最大激发波长（λex）：若保持荧光发射波长为其最大发射波长，然后测定不同激发波长时的荧光强度，即得荧光激发光谱曲线，其荧光强度最大的波长即为物质的最大激发波长. 9.荧光分光光度计的结构：激发光源、激发单色器、样品室、发射单色器、光接受器、放大记录系统。 10.荧光分光光度计的激发光源常用高压汞灯和氙弧灯。 11.原子吸收分光光度计的常用光源是空心阴极灯，还有一种是无电极放电灯。 12.原子吸收分光光度计对光源的基本要求是：发射的特征波长的半宽度要明显小于吸收线的半宽度，辐射强度大，背景小，稳定性好，噪声小以及使用寿命长。 13.原子吸收光谱定量分析的基础是：　原子吸收光谱分析是基于试样蒸气相中被测元素的基态原子对由光源发出的该原子的特征性窄频辐射产生共振吸收，其吸光度在一定范围内与蒸气相中被测元素的基态原子浓度成正比，以此测定试样中该元素含量的一种仪器分析方法。蛋白质含量测定方法即定氮法双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）和紫外吸收法考马斯亮蓝法（Bradford法）。其中Bradford法和Lowry法灵敏度最高，比紫外吸收法灵敏10～20倍，比Biuret法灵敏100倍以上。定氮法虽然比较复杂，但较准确，往往以定氮法测定的蛋白质作为其他方法的标准蛋白质。值得注意的是，这后四种方法并不能在任何条件下适用于任何形式的蛋白质，因为一种蛋白质溶液用这四种方法测定，有可能得出四种不同的结果。每种测定法都不是完美无缺的，都有其优缺点。在选择方法时应考虑：①实验对测定所要求的灵敏度和精确度；②蛋白质的性质；③溶液中存在的干扰物质；④测定所要花费的时间。考马斯亮蓝法（Bradford法），由于其突出的优点，正得到越来越广泛的应用。 三种方法和原理 一、氨基酸自动分析仪法.原理食物蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸，经氨基酸分析仪的离子交换柱分离后，与茚三酮溶液产生颜色反应，再通过分光光度计比色测定氨基酸含量。一份水解液可同时测定天冬，苏，丝，谷，脯，甘，丙，缬，蛋，异亮，亮，酪，苯丙，组，赖和精氨酸等16种氨基酸，其最低检出限为10pmol 二氨基酸自动分析仪法（过甲酸氧化）.原理在用盐酸水解蛋白质的过程中，胱氨酸易被破坏，现多采用过甲酸氧化法将蛋白质中的胱氨酸及半胱氨酸氧化成半胱磺酸 三、荧光分光光度法.原理食物中蛋白质在酸水解过程中，其色氨酸极易被分解，本法用碱水解蛋白质，直接测定色氨酸的天然荧光。在蛋白质水解液中，只有色氨酸和酪氨酸可以检测到荧光。在pH为11时，色氨酸的荧光强度比酪氨酸大100倍，且两种氨基酸的荧光峰相差40多nm，利用此特点，可在有大量酪氨酸的存在下，检测色氨酸的含量 3