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认识核酸在生命科学上重要性
不积蹞步,无以致千里;不积小流,无以成江海 豆丁网友友情分享 核 酸 认识核酸在生命科学上的重要性 弄清碱基、核苷、核苷酸和核酸分子结构上的关系 了解核酸的化学本质及DNA和RNA在组分、结构和功能上的差异 认识核酸的结构与其性质与功能之间的关系。 1868年 F.Miescher首先从伤员绷带的脓细胞中分离得到称为“核素”的核酸 1944年 O.N.Avery通过转化实验证实DNA是主要的遗传物质 1953年 J. D.Watson和F.H.C.Crick提出DNA 双螺旋结构模型 1958 Crick提出遗传信息传递的中心法则 1970s 建立DNA重组技术 1980s后 分子生物学、分子遗传学等学科突飞猛进发展,提出并完成HGP 一. 核酸的概念和重要性 二. 核酸的化学组成及其基本结构单位核苷酸 三. 核酸的一级结构及其测定 四. DNA的高级结构 五. RNA的高级结构 六.核酸和核苷酸的理化性质 七.核酸的分离提取和纯化 一.核酸的概念和重要性 核酸的概念 核酸是酸性的大分子物质,在活细胞中与碱性蛋白结合,以核蛋白形式存在。 核酸分为脱氧核糖核酸 ( DNA )以及核糖核酸 (RNA)两类,DNA所含核苷酸分子数比RNA大得多。 RNA分为三个类型,即核蛋白体 RNA(rRNA)、信使RNA(mRNA)和转移RNA(tRNA),它们都参与蛋白质合成 脱氧核糖核酸和核糖核酸异同的对比 DNA是遗传的物质基础,负责遗传信息的贮存和发布,遗传基因就是DNA链上的若干核苷酸所组成的片段。 RNA负责遗传信息的表达,直接参与蛋白质生物合成,转录DNA所发布的遗传信息,并将之翻译给蛋白质,使生命机体的生长、发育、繁殖和遗传得以继续进行。 核酸类物质RNA的重要功能 二.核酸的化学组成及其基本结构单位核苷酸 核酸的化学组成 元素组成:C、H、O、N、P P元素的含量较多并且恒定,约占9~11%。 核酸在酸、碱或酶作用下会水解成核苷酸,进一步水解可得碱基(嘌呤或嘧啶),戊糖(核糖或脱氧核糖) 和磷酸 (一)戊糖 (四)核苷酸(nucleotide)核苷酸 核苷+磷酸 戊糖+碱基+磷酸 (四)核苷酸(nucleotide)脱氧核苷酸 (四)核苷酸(nucleotide)核苷酸 (五)核苷酸衍生物 (五)核苷酸衍生物 3. 肌苷酸及鸟苷酸(特鲜味精) 三. 核酸的一级结构及其测定 核酸的一级结构 核酸的一级结构是核酸中各核苷酸化学键连接方式即核苷酸排列顺序。 核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键连接起来,以磷酸-糖-磷酸-糖…形成核酸骨架 核酸分子的核苷酸序列分析是以纯品核酸为材料,经水解,测定核苷酸组成及比例。先以外切酶确定5’-或3’-末端核苷酸,再以内切酶将核酸链分为若干寡核苷酸段,分段测定核苷酸组成、比例和序列。最后将核苷酸序列的各寡核苷酸重叠,确定整个核酸分子的核苷酸序列。 DNA酶法测序 1977年sanger发明末端终止法测定DNA序列 根据sanger测序法,现在已经有各种DNA自动测序仪,DNA测序速度大大加快HGP得以提前完成 DNA酶法测序 DNA酶法测序 DNA酶法测序 DNA酶法测序 四. DNA的高级结构 DNA的二级结构 DNA的三级结构 DNA的二级结构 DNA的二级结构是双螺旋结构,即两条多聚核苷酸链围绕一个共同轴,相互盘绕在一起构成直径 2nm的双螺旋,互补的碱基(A和T互补 ,G和C互补)通过氢键连接在螺旋内部,碱基平面垂直于右旋的螺旋轴。螺旋结构中两条链走向相反 DNA的二级结构类型 稳定DNA双螺旋结构的三种力量 氢键:使四种碱基形成特异配对关系,G-C间可形成3对氢键,A-T之间有两对氢键 。 疏水相互作用:轴向平行相邻的碱基平面自发地相互靠近,从而使碱基缔合、层层堆积,形成了碱基堆积力 ,它是使DNA结构稳定的主要力量。 离子键:磷酸残基上的负电荷与介质中的正离子,如Na+,K+,Mg+等之间形成的离子键。 核酸的三级结构指链状核酸分子的空间构型,即其三维空间排列或组合方式。 DNA的三级结构主要有以下三种: 回文结构与镜像结构 回文结构中的单链可形成发夹结构 双链回文结构可形成十字架结构 五. RNA的高级结构 RNA的二级结构 RNA的三级结构 RNA的二级结构 RNA的二级结构基本上是单股分子,其二级结构比DNA简单的多,但也存在少数碱基配对区域即双螺环结构。 (1)占总RNA的15% (2)一种氨基酸对应最少一种RNA (3)分子中含有较多修饰成分 (
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