5.3血红蛋白提取和分离(组内公开课).pptVIP

2.纯化：凝胶色谱法 1）凝胶色谱柱的制作 ①取长40厘米，内径1.6厘米的玻璃管，两端需用砂纸磨平。 ②底塞的制作：打孔 挖出凹穴 安装移液管头部 覆盖尼龙网，再用100目尼龙纱包好。 a、选择合适的的橡皮塞，中间打孔； b、在橡皮塞顶部切出锅底状的（ ），在0.5ml的（ ）头部切下（ ）长的一段，插入橡皮塞孔内，上部不得超过橡皮塞的凹穴底面。 凹穴 移液管 5cm 二、实验操作 底塞中插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面，否则难以铺实尼龙网，还会导致液体残留，蛋白质分离不彻底。 c.剪尼龙网小圆片覆盖在（ ）上，用（ ）的尼龙纱将橡皮塞（ ）包好，插到玻璃管一端。 d、色谱柱下端用移液头部做（ ），连接一细的（ ），并用螺旋夹控制尼龙管的（ ），另一端放入收集（ ）的收集器内 橡皮塞的凹面 100目 上部 出口部位 尼龙管 打开与关闭 色谱流出液 2.纯化：凝胶色谱法 （1）凝胶色谱柱的制作 ⑤安装其他附属结构。 ③顶塞的制作： 插入安装了玻璃管的橡皮塞 ④组装：将上述三者按相应位置组装成一个整体。 2.血红蛋白纯化：凝胶色谱法 2）凝胶色谱柱填料的处理 （1）凝胶的选择： （