乙基咪唑酸酯探针对荧光和质谱双增敏作用.docVIP

2-(苯并吖啶酮)-乙基咪唑酸酯探针对荧光和质谱的双增敏作用 作者：付艳艳 李肖燕 孙志伟 秦雪芹 夏莲　索有瑞 李玉林 尤进茂 【摘要】 采用3种不同衍生方法对胺类化合物进行标记，比较衍生效率的差别，给出最优方法：5-(2-羟乙基)-(苯并吖啶酮与N，N-羰基双咪唑(CDI)缩合形成的双敏感探针2-(苯并吖啶酮)-乙基咪唑酸酯(BAEIC)与胺的衍生效率最高，产物稳定。BAEIC在N，N-二甲基甲酰胺 (DMF) 溶剂中以4-二甲氨基吡啶 (DMAP) 为催化剂，在80 ℃条件下与胺反应生成的亲核取代物，不仅表现出强烈的荧光，同时具有很强的质谱离子化能力。估算了衍生物在乙腈和甲醇水溶液中百分离子化值δ在5.62%～58.08%和2.14%～56.58%范围内。本方法具有良好的重现性，激发和发射波长为λex/λem=280/510 nm，荧光检出限为0.12～0.59 μg/L(8.6～79 fmol)； 在线APCI-MS检出限为1.9～14 μg/L(544～825 fmol)。 【关键词】 液相色谱-质谱； 脂肪胺； 5-(2-羟乙基)-苯并吖啶酮； 2-(苯并吖啶酮)-乙基咪唑酸酯 Abstract With comparison of three different methods for the marking of amines compound，an optimal derivatization method was selected.5-(2-Hydroxyethyl)benzoacridine（HBA) reacts with coupling agent N，N′-carbonyldiimidazole（CDI) to form an activated amide intermediate 2-(benzoacridin)ethyl-imidazole-1-carboxylate（BAEIC).BAEIC，which is dual-sensitive probe，reacts preferably with amino compounds at 80 ℃ in the presence of 4-dimethylaminopyridine（DMAP) catalyst in N，N-dimethylformamide（DMF) solvent to give the corresponding sensitively fluorescent derivatives with an excitation maximum at λex of 280 nm and an emission maximum at λem of 510 nm.BAEIC-amine derivatives simultaneously exhibited high ionization potential with percent ionization（ changing from 5.62% to 58.08% in aqueous acetonitrile and from 2.14% to 56.58% in aqueous methanol.Derivatives were not only sensitive to fluorescence but also to MS ionizable potential.The fluorescence detection limits（S/N=3) were 0.12-0.59 μg/L.The online APCI-MS detection limits were 1.9-14 μg/L(S/N=5). 　　Keywords High performance liquid chromatography/mass spectrometry； Ａliphatic amines； 5-(2-Ｈydroxyethyl)benzoacridine； 2-(Ｂenzoacridin)ethyl-imidazole-1- carboxylate 　　1 引言 　　质谱和荧光技术广泛应用于环境科学、毒物学及生命科学等领域中，用于确定诸多生物活性分子的含量及化学结构[1~3]。环境中的胺多是由蛋白质、氨基酸等含氮类有机化合物经生物降解而成。大多数胺类化合物在亚硝化剂存在下可生成强致癌性的N-亚硝基化合物[4~8]，因此，检测环境中的胺具有重要意义。目前，检测胺的方法主要有气相色谱法[9]和离子交换法[10]。尽管方法简便易行，但由于灵敏度低而受到限制。为提高检测灵敏度和改善选择性，采用柱前或柱后衍生化是一种行之有效的手段。但测定胺类化合物所用试剂较多[11~14]，如常用荧光试剂FMO