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我国马铃薯转基因与脱毒种薯生产
我国马铃薯转基因与脱毒种薯生产
一 、马铃薯简介
(一)马铃薯基本知识
马铃薯是茄科茄属一年生草本植物,又名土豆、洋芋、山药蛋、地豆、山药等,马铃薯是具有分布广、适应性强、生育期短、产量高、营养丰富等特点的粮菜兼用型作物,也是继小麦、玉米、水稻之后的第4大粮食作物。马铃薯原产于南美洲的安第斯山山区,距今约有8000年的栽培历史,明朝万历年间(16世纪末)传入我国,在我国有400多年的种植历史了。
目前世界马铃薯种植面积为2000万hm2,总产量3亿t;我国种植面积500万hm2,是世界第一大马铃薯生产国,在我国马铃薯栽培形成了相对集中的、各具特色的北方一作区、中原二作区、西南单双季作区和南方冬作区四大区域。
(二)马铃薯的营养价值和用途
马铃薯的块茎中含有大量碳水化合物,含量约为16.5%,其中大部分为淀粉,并含有少量的非淀粉性多糖、蔗糖、还原糖等,是人类获得碳水化合物的一个重要来源。马铃薯的块茎中蛋白质的含量为1.5%~2.3%。马铃薯的蛋白质为完全蛋白,其中含有人体需要但体内又不能合成的8种必需氨基酸。这些氨基酸的含量和比例符合人体需要,因此,马铃薯的蛋白质具有很高的营养价值。马铃薯的块茎中维生素的含量很丰富,可与蔬菜、水果媲美。在西方国家马铃薯被称为“地下苹果”、“长寿食品”。
马铃薯加工业中最重要的当属马铃薯淀粉生产。但到目前为止仍缺少规模化的生产和综合利用的能力, 更缺少深度加工的产品, 如各种工业用途的精制淀粉及淀粉糖。随着农业科学技术的发展,在重视品种选育和贮藏技术研究、保证原料质量的同时,运用先进的技术和设备,我国的马铃薯生产将会越来越迅速的增长,而且一定能生产出高质量的产品,进而在食品、医药、化工、橡胶、造纸、塑料、农药等重要工业生产中发挥更大的作用。
二、我国马铃薯转基因工程
马铃薯的病害主要有真菌性、细菌性、病毒性三种类型。马铃薯病害范围很广,这些病害是引起马铃薯种性退化的主要原因之一。种性退化不仅影响产量,重要的是降低了马铃薯品质。由于马铃薯主要靠无性繁殖, 在无性繁殖过程中易感染病毒,当条件适合时,病毒就会在植株内增殖,转运和积累于所结块茎中,随着世代传递,病毒危害逐年加重,引起种性退化。据估计,每年世界上马铃薯生产由病毒造成的减产至少为20%,,在造成减产的同时,病毒也影响马铃薯的质量。
因此,自1983年首次获得烟草转基因植株以来, 以基因工程技术为核心的现代生物技术发展迅速, 近20多年的时间里, 已有140多种植物相继被转化,内容涉及抗虫、抗真菌、抗病毒、抗除草剂、品质改良、提高种子蛋白的营养价值、延长保鲜期、雄性不育、花色、花形改变等多个方面。由于马铃薯其组织与细胞培养技术成熟、植株再生较容易, 遗传转化的各种手段均可采用, 又可以通过块茎无性繁殖将转基因的特性传递给后代而无需经纯化或多代选育, 因此, 马铃薯成为最早一批获得转基因成功的植物。目前, 利用基因工程技术改良马铃薯的品质、培育抗病虫新品种已经成为当今马铃薯育种的重要内容之一。
(一)马铃薯抗病毒病基因工程
为害马铃薯的病毒病有30余种,其中普遍存在且危害严重的有PVX( 马铃薯X病毒)、PVY( 马铃薯Y病毒)和PLRV(卷叶病毒), 而PVX+ PVY、PVY+ PLRV混合型病毒病的危害更加严重。马铃薯抗病毒基因工程主要有:病毒外壳蛋白(CP)基因的交叉保护作用,RNA和反义RNA介导的抗性,核酶、缺损的复制酶基因介导的抗性以及干扰运动蛋白等。
利用病毒外壳蛋白(CP)基因是抗病毒基因工程的热点之一。许多学者将PVX、PVY及PLRV的CP基因导入马铃薯获得成功[5];宋艳茹等通过构建PVX+ PVY和PVY+ PLRV双价外壳蛋白基因表达载体,遗传转化获得的部分转基因马铃薯植株表现出对PVY的抗性明显提高[6]。除转CP基因外,利用反义RNA技术,董丽江等克隆PLRV-CHIS序列cDNA,以正向和反向两种方式分别构建植物表达载体,获得马铃薯转基因植株,并以带毒桃蚜接种测试。实验表明,表达IS区反义RNA的转基因植物对PLRV的抗性较表达正义RNA的转基因植株的抗性强[7]。项瑜等以马铃薯Y病毒中国分离株(PVY-C)的mRNA作为模板获得了PVY-C的核内含体b(Nlb)全长cDNA克隆,以Nlb基因分别构建了全长序列、5`端缺失381个碱基的序列和Nlb的反义RNA序列三种不同形式的植物表达载体,转化烟草后通过检测转基因植株发现,不同形式的Nlb基因序列的转基因植株对马铃薯Y病毒表现出不同程度的抗性[8]。利用核酶技术,杨希才等将人工合成的核酶基因介导特异切割的PSTVd RNA 转入马铃薯,获得了抗PSTVd的转基因马铃薯[9]。
在我国马铃薯抗病毒基因工程的成果还有很多, 随着对病毒
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