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黑皮质素4型受体在神经理性疼痛中的作用
大鼠PAG置管 固定于脑立 体定位仪 牙托粉固定 大鼠麻醉 暴露颅骨 PAG置管 单笼喂养 注:PAG单侧:(AP 7.68,L0.6,H6.0 mm) 埋植不锈钢套管(长11mm,外径0.6mm)。套管尖端高于注射部位1.5mm,套管内插入等长不锈钢管芯。 PAG微量注射 用1ul微量注射器通过注射内管PAG注射 HS014或NS,每次注射容量均0.5ul,1min内匀速注完,留针1min,避免药液外漏. 大鼠CCI模型的制备 剪去体毛 消毒右下肢 逐层缝合 切口 大鼠麻醉 暴露坐骨 神经主干 结扎坐骨 神经 单笼喂养 注:坐骨神经结扎:用4-0的铬制羊肠线松扎4道, 间距为1mm, 结扎强度以引起小腿肌肉轻度颤动反应为宜。 热痛阈值测定 大鼠于术前及术后1,3,7,11,14天, 给药后60min内,采用热板测痛仪测试大鼠的热痛阈值。 结果 热痛阈值变化 注:与术前比较,*P0.05 , **P0.01; 与B组比较, #P0.05, ##P0.01 C组 C组 C组 分组 术前0d 术后1d 术后3d 术后7d 术后14d A 0.16±0.03 0.16±0.03 0.14±0.02 0.15±0.02 0.15±0.03 B 0.14±0.02 0.15±0.02 0.25±0.03* 0.33±0.05** 0.43±0.06** C 0.15±0.04 0.15±0.03 0.20±0.03*# 0.26±0.02*# 0.22±0.04*## 各组术后不同时间点GFAP的表达 (x ±s ) 注:与术前比较,*P0.05 ,**P0.01 ; 与B组比较, #P 0.05, ##P 0.01 各组术后不同时间点GFAP的表达 各组PAG中GFAP的表达 SABC 染色 ×400 B3 B7 A3 A7 A14 B14 C3 C7 C14 各组术后不同时间点IL-1β的表达 (χ± s) 分组 术前0d 术后1d 术后3d 术后7d 术后14d A 10.80±3.77 11.00±2.12 11.80±3.35 10.80±2.78 11.80±3.27 B 11.60±3.05 25.60±4.16** 28.00±5.52** 31.40±3.85** 40.40±6.66** C 12.00±4.06 20.40±2.61*# 21.80±3.77*# 24.60±2.30**# 23.4±2.61*## 注:与术前比较,*P0.05 ,**P0.01 ; 与B组比较, #P0.05, ##P0.01 各组术后不同时间点IL-1β的表达 各组PAG中GFAP的表达 SABC 染色 ×400 A1 A3 A7 B1 B3 B7 C1 C3 C7 A14 B14 C14 各组术后不同时间点TNF-α的表达 (χ± s) 分组 术前0d 术后1d 术后3d 术后7d 术后14d A 10.00±3.16 11.40±3.78 10.40±1.52 10.80±2.17 11.80±2.59 B 12.60±3.36 21.00±3.54* 22.40±3.51* 31.20±4.21** 36.00±5.61** C 11.20±2.17 16.20±2.77*# 17.40±2.61*# 20.80±3.11**# 19.60±3.85*## 注:与术前比较,*P0.05 ,**P0.01 ; 与B组比较, #P 0.05,##P0.01 各组术后不同时间点TNF-α的表达 各组PAG中TNF-α的表达 SABC 染色 ×400 A1 A3 A7 A14 B1 B3 B7 B14 C1 C3 C7 C14 最主要的是本研究发现: PAG给予HS014可明显抑制CCI后星形胶质细胞的激活及促炎性细胞因子的表达。 提示在外周神经损伤后,PAG中MC4R可能通
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