检验技术操作指南.docVIP

PAGE PAGE 11血块收缩试验：操作步骤：试管内径8mm静脉采血1ml记录抽血时间。置370结果判断：完全收缩：血块收缩结成硬块，脱离管壁沉于管底析出大量血清，其体积等于原取血量的1/3或1/2。部分收缩：血块明显收缩，部分黏附管壁，但完全收缩，血块还结得不硬。收缩不良：血块略收缩，析出极少量血清。没有收缩：血块粘着试验，管壁无血清析出。报告方式：本试验以“开始收缩时间”（一小时开始收缩或未开始收缩）“完全收缩”报告制。有些正常血液有时与管壁粘连很紧，亦可无收缩现象，如当日不见收缩，可用细竹签收血块与管壁轻轻剥离，于24小时再观察一次，此时应分量血清与血块的容积，算出百分比报告之。正常值：30?60分钟开始收缩于18?24小时完全收缩。(2)奎克氏（Quick）期法试剂：兔脑粉凝血质。M/40氯化钙溶液：无水氯化钙1.11g蒸馏水加至400ml兔脑浸液：干燥兔脑粉100mg，加生理盐水2ml用小玻璃棒搅匀放入400C?500操作步骤：小试管加1.34%草酸钠溶液0.2ml及患者血液1.8ml混匀离心分血浆。取另一支试管置370本试验亦可于表面玻璃内进行。报告方法：奎克氏—期法，凝血酶原时间**秒。此方法要求：用正常人血做正常值对照。正常值：12?14秒比正常对照延长3秒以上有诊断意义。（3）凝血酶原消耗试验：1、分离血清：取患者静脉血2ml，待血液凝固后，置3702、硫酸钡吸附血浆的制备，取新鲜正常人草酸盐血浆，按血浆每ml加硫酸钡100mg的比例，将草酸盐血浆与硫酸钡混合，于370C水浴用玻璃棒搅拌15分钟后取出，3000rpm离心30分钟，吸出上层血浆，即为硫酸钡，吸附血浆，存3、测定方法：本试验须在370正常值：20秒以上（血凝后一小时值）（4）溶血性疾病检查：网织红细胞计数：玻片法：取1%煌焦油兰乙醇溶液一大滴置玻片一端待干加血一大滴与之混合，约待2?5分钟，制成薄匀红细胞不可有重叠一次制片至少在两张以上。不必复染或短时间瑞氏染色，计数1000个红细胞按百分率报告。试管法：1、取1%煌焦油兰生理盐水溶液5滴，加新鲜血液2滴混匀，放置约10分钟。2、吸出一小滴制成薄血片，计数1000个红细胞按百分率报告。正常值：0.5?1.5%红细胞渗透脆性试验取消试管15支，操作按表顺序进行不同浓度低渗盐水溶液配法试管号：（ml）1234567891011121314150.5%NaCl1.251.201.151.101.051.00.950.90.850.800.750.700.650.600.55蒸馏水0.050.100.150.200.250.300.350.400.450.500.550.600.650.70浓度%0.50.480.460.440.420.400.380.360.340.320.300.280.260.240.22用干燥的无菌注射器及针头（6.5号）抽静脉血1ml，保留针头，立即滴入上述15支生理盐水管中，每管加血液一滴，轻轻摇匀。室温静置2小时，观察溶血结果。必要时离心后观察结果。结果判断：开始溶血，上层液呈淡红色，而绝大部分红细胞下沉。完全溶血，上层呈红色管底无红细胞沉淀。未溶血，上层液清晰无色。正常值：开始溶血0.40?0.46%NaCl溶液。完全溶血0.30?0.36%NaCl溶液。附：对黄疸患者之操作处理，取血2ml，注入贮有1.5%枸橼酸钠生理盐水，摇匀后离心。如此，反复操作3?5次。于上述15支试管中各加洗过的红细胞0.05ml室温静置2小时或离心后观察结果。报告方式：开始溶血**%完全溶血**%NaCl中。血浆游离血红蛋白测定：试剂：联苯胺试剂：取联苯0.1g溶于冰醋酸2ml中，加上3ml溶解后用95%的乙醇稀释至10ml，冰箱保存可用一周。如联苯胺部分氧化，试剂呈黄色，不可用。最好新鲜配制。0.6%过氧化氢：取浓过氧化氢液（28%）0.5ml加水22.5ml新配。 血红蛋白标准曲线制备：按全血铁法测定一份全血铁含量，除以3.47，即得每100ml血红蛋白含量。例如：全铁48.5mg，血红蛋白即为14g。吸取0.1ml全血用水稀释至14ml即得100mg/dl血红蛋白液再用水稀释成10.20、30.40、50mg血红蛋白液，按下述操作方法制标准曲线。操作：按下表进行。血浆游离血红蛋白加液表取两个三角烧瓶标明测定空白血浆或血红蛋白液（ml）0.05蒸馏水 （ml）0.951.00联苯胺（ml）2.002.000.6%双氧水（ml）1.001.0020%醋酸（ml）20.0020.000.6%双氧水室温放置1小时注意事项：采取标本时切忌溶血，及时分离血浆联苯胺质量要好，应当置备标准曲线时所用相同。（5）海恩次氏（heinz）小体检查法：1〉在一小试管，内加0.5%硫酸奈耳兰（Nile