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植物组织培养技术The Technology of Plant Tissue Culture 西南大学 生命科学学院 汤绍虎 2011.11 主讲内容： 一、植物组织培养的概念及分类 二、植物组织培养的生理依据 三、植物组织培养的应用 四、植物组织培养的操作技术 五、试管苗移栽 一、植物组织培养的概念及分类 （一）植物组织培养的概念 植物组织培养（plant tissue culture）的原始意义是指：由植物各种器官的外植体增殖而成的愈伤组织的培养，这是植物组织培养的狭义概念。但植物组织培养经过百余年的发展，至今其范围日益扩大。 植物组织培养的广义概念：包括植物及植物器官、组织、细胞和原生质体等植物各种离体生活部份的培养。 由于培养物是脱离母体在试管、三角瓶等容器里中培养，所以植物组织培养也称植物的离体培养（culture in vitro）。 （二）植物组织培养的分类 一般根据培养材料和方式进行分类。 1、根据外植体来源，植物组织培养分为： （1）植株培养：幼苗或较大完整植株的培养。 （2）胚胎培养：成熟和未成熟胚胎的培养。 （3）器官培养：构成植物体的各种器官的离体培养。包括根茎叶和花、果实等。如茎尖（苗段）培养可以实现良种的快速繁殖。 （4）愈伤组织培养：指由外植体脱分化而形成的愈伤组织的培养，即狭义的植物组织培养。愈伤组织可以通过再分化形成植株。 （5）组织培养：这里的“组织”，是指植物形态学上的组织。在这里，作为考查外植体来源的组织培养，是指构成植物体各种组织的离体培养。如分生组织、输导组织、薄壁组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮、皮层等的离体培养。如茎尖分生组织培养可以生产脱毒苗。 （6）细胞培养：能保持良好分散状态的离体细胞或小的细胞团的培养。通常采用液体悬浮培养方法，故又称悬浮培养。细胞悬浮培养主要用于生产植物次生代谢产物。 （7）原生质体培养：指植物细胞经过特定酶（果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶等）处理，除去细胞壁后所获得的裸露原生质体的培养。原生质体培养主要用于体细胞杂交，获得体细胞杂种。 2、根据培养方式不同，植物组织培养分为： （1）固体培养：通常以琼脂为固化剂。 （2）液体培养：包括静止、振荡、旋转培养。 植物组织培养的分类： 植株培养 胚胎培养 器官培养 培养材料 组织培养（包括愈伤组织培养） 细胞培养 原生质体培养 固体培养 培养方式 振荡培养 液体培养 旋转培养 静止培养（包括纸桥培养） 二、植物组织培养的生理依据 1、植物细胞的全能性 细胞是植物体的基本结构与功能单位。每个植物细胞含有全套遗传信息，在适宜的外界条件下具有形成完整植株的能力。 2、植物细胞全能性学说的提出与证明 1902年，德国著名植物学家Haberlandt认为每个细胞具有植物个体一样的性质和功能，可以通过离体培养，把单个细胞培养成为新个体。并主要对单子叶植物的叶肉细胞、表皮细胞等进行了培养。 1934年，美国的White在番茄根尖培养中，建立了第一个活跃生长的无性系。1939年，在烟草茎段愈伤组织培养中，他偶然发现了一个再生的不定芽，并重新提出了植物细胞的全能性学说。 1958年，英国的Steward和法国的Reinert在胡萝卜愈伤组织的细胞培养中，经过6年努力获得了完整植株，首先对植物细胞全能性学说给予了科学证明。之后，植物组织培养得到了快速发展。 3、为什么植物细胞在适宜的离体条件下能够表现出全能性，而在整体植物上则有形态与功能上的差异呢？ 处于整体植物