平面色谱法ppt课件.ppt

溶剂蒸气的影响 未经溶剂蒸气预平衡 展开室预先用溶剂蒸气平衡 人参皂甙的薄层色谱 展开溶剂的蒸气也参与色谱展开的全过程。（固相－板上的吸附剂如硅胶、液相－展开剂、气相－溶剂蒸气三相相互作用） 相对湿度的影响 苍术提取物薄层色谱图 可用浓硫酸-水体系调节 温度的影响 淫羊藿薄层色谱 *宝藿苷Ⅵ 薄层色谱操作过程（5） 定位/洗脱 定位方法 光学检出法：荧光显示、荧光淬灭 蒸气检出法：碘蒸气法（可逆，不可逆反应） 试剂显色法：喷雾显色法、浸渍显色法 洗脱方法 取下TLC上分离的斑点、用溶剂将化合物的斑点从吸附剂上定量洗脱下来，收集洗脱液并用适当方法测定。 拍照——最佳数据保存方法 连翘薄层色谱 3-3 薄层色谱参数 定性参数及于相平衡参数关系 比移值；相对比移值 板效参数 理论塔板数；理论板高 分离评价参数 分离度；分离数 定性参数及于相平衡参数关系（1） 比移值 溶剂前沿 起始线/原点 展开剂 有颜色或显色 同一物质在相同薄层条件下Rf值相等。 定性参数及于相平衡参数关系（2） 相平衡参数 分配系数 分配比（保留因子、容量因子） 与温度、组分及两相性质有关，K值不同分离的前提 Vm：薄层板中流动相的体积 Vs：不同模式色谱含义不同， 分配色谱中指固定相的体积 衡量薄层板对待测组分保留能力的重要参数 定性参数及于相平衡参数关系（3） 比移值与相平衡参数关系 推导：设展开剂流速为u，则组分的平均流速 设展开时间为t，则： 薄层条件确定情况下，K?， k?，R??组分难洗脱 关于Rf的几点讨论（1） Rf与K和k有关，即与组分性质、薄层板和展开剂性质有关 色谱条件一定， Rf只与组分性质有关（TLC定性参数） K?， k?，R??组分难洗脱 改变展开剂极性可以改变K和k，进一步改变Rf Rf=0，K=?，组分极性过大（不展开），可增加展开剂的极性，如仍不能提高Rf，则组分极性过高，可更换低活性硅胶板或用反相薄层板以增大Rf 关于Rf的几点讨论（2） Rf=1，K=0，组分极性过小（不吸附），可降低展开剂极性（或增加硅胶的吸附活性）降低Rf 对于极性组分，当采用硅胶吸附薄层板时： 展开剂极性?，k?，R?（容易洗脱） 展开剂极性? ，k ? ，R ? （不容易洗脱） Rf范围：0? Rf ? 1； Rf 0.2?0.8（常用）；Rf 0.3?0.5（最佳） 定性参数及于相平衡参数关系（4） 相对比移值Rx 讨论： 相对比移值Rx与组分和参考物性质（溶解度等）及色谱条件有关，范围可以大于或者小于1 由于参考物与待测物采用完全形同的色谱条件展开，可以消除系统误差，大大提高结果的重复性和可靠性 参考物既可以是加入样品的纯物质，亦可以是样品中某一已知组分 行业处理客户投诉的技巧课件神经内科医疗质量及管理规范神经疾病病情观察及能力培养社区老年痴呆的全科诊疗身边的侵害和保护少先队礼仪文化知识培训 平面色谱法（TLC） 3-1 概述 3-2 薄层色谱系统 3-3 薄层色谱参数 3-4 薄层色谱条件选择 3-5 薄层色谱的应用 3-1 概述（1） 薄层色谱法 指固定相涂布于平面载体上，流动相通常是借助毛细管作用流经固定相，使被分离的物质保留在固定相上的色谱方法 分类 纸色谱 薄层色谱 薄层电泳 纸色谱法 纸色谱是以滤纸为载体的液-液分配色谱。滤纸由纤维素制成，其分子中具有很多羟基，有较强的亲水性，能吸收20~25%的水分，其中6%左右的水分通过氢键与纤维素上的羟基相结合形成的固定相。 若要分离非极性物质可用适当的低级性液体如石蜡油、硅油等处理滤纸。 流动相（展开剂）：与水不相溶（或部分相溶）的溶剂 分离原理： 与待分离组分无作用？ 正相色谱 反相色谱 K越大随流动相移动越慢， 反之越快，从而实现分离 薄层色谱 将固定相于玻璃或铝箔等载板上涂布成均匀的薄层。展开剂（流动相）借助毛细作用从薄层板点样的一端展开到另一端时使不同物质得到分离。 分离原理随固定相不同而异，基本与柱色谱相同，可分为吸附薄层、分配薄层、离子交换薄层以及凝胶薄层等。 固定相种类多样、显色剂选择及载样量均较纸色谱大，而切割色谱带较柱色谱方便，因此在分离分析及小量制备工作中最为常用。 薄层电泳 电泳法指在一定电场作用下，荷电粒子（如蛋白质、核苷酸、多肽、糖类等）在纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶等惰性支持介质上，因粒子大小及荷电种类、数量不同，向两极以不同速度迁移而得到分离的方法。对分离后的组分洗脱后测定或直接扫描可进行定性或定量分析。 驱动力来源、仪器设备及测定对象与纸色谱、薄层色谱差别较大，暂不一起介绍。 3-1 概述（2） 平面色谱法的特点： 仪器自动化程度、分辨率及重现性不及GC、HPLC 一次性的固定相，对样品