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微生物标本正确采集及运送 标本采集的意义 明确诊断真正致病菌 病情追踪 指导制定治疗措施 抗生素选择 抗生素更换 预后推测 减少细菌耐药性 结果无意义 规范化采集 不符合要求 提供重要临床感染信息 处理失当造成 污染 误导临床 标本 检验前误差 Clin Chem. 2007 Jul;53(7):1338-42. Epub 2007 May 24 Clin Chem Lab Med. 2006;44(6):750-9 检验前误差是导致检验结果失真的最主要原因之一 细菌诊断标本采集原则 用抗菌素前采集，不同时期、不同标本 采样时严格执行无菌操作，避免污染 采集真正病灶处且足量标本→避免假阴性 标本需新鲜，不可添加防腐剂 立即送检→愈新鲜标本愈容易分离病原菌 痰液标本采集 采集时间：晨痰，因晨痰量多，且含菌量也多 先以冷开水漱口刷牙，有假牙者应取下假牙 做深呼吸数次后收腹用力深咳 将痰吐到宽口无菌加盖容器 2小时内送达检验室（未能及时送检于4℃保存）（苛养菌如肺炎链球菌减少，正常菌过度生长） 年老体弱、无力咳痰、下呼吸道分泌物不多时 怎办？ 粘液丝 卫生部医政司《全国临床检验操作规程》 鳞状上皮细胞SBC25 白细胞WBC10 /每低倍视野 为不合格痰=拒收 鳞状上皮细胞SBC10 白细胞WBC25 /每低倍视野为合格痰 =接受培养 卫生部医政司《全国临床检验操作规程》 鳞状上皮细胞SBC25 白细胞WBC25 /每低倍视野 鳞状上皮细胞SBC10-25 白细胞WBC25 /每低倍视野 卫生部医政司《全国临床检验操作规程》 白细胞吞噬革兰阴性杆菌 / 革兰阳性球菌 未见白细胞吞噬 血液标本采集 采集时机 消毒规范 双侧双瓶 最佳采血时机-1 研究指出： 在使用抗生素前采血，阳性率是用药后采血的2.2倍！ 最佳采血时机-2 病人准备：正确消毒方式 培养瓶消毒：以75%酒精消毒瓶口 皮肤消毒： 采血点由内往外，以75%酒精用力涂抹皮肤 内往外划圈用力涂抹皮肤，待干燥以达杀菌效果 （等待时间：碘伏约1-3分钟，碘酊约30秒） 75%酒精由内往外去除碘液，避免污染 血培养采集 绿色盖子：含活性炭需氧 橘色盖子：含活性炭厌氧 紫色盖子：普通厌氧 蓝色盖子：普通需氧 黄色盖子：普通小儿瓶 血培养采集 双侧双瓶 为何？ 提高阳性率 判断污染与否 影响血培养阳性率因素 血培养的组合与检出率 J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548 致病菌和污染菌的鉴别 真正菌血症： 分离有毒力的菌株 肺炎链球菌 克雷伯菌属 假单胞菌属 金黄色葡萄球菌 肠杆菌科 念珠菌属 存在危险因素 免疫抑制 假体手术 留置导管 多部位分离相同菌株 污染菌 培养时间长 后续培养没有可重复性 分离多种微生物 临床情况不提示存在感染 分离皮肤定植菌 凝固酶阴性葡萄球菌： 类白喉杆菌 杆菌属 3天阴性的血培养-需重送检 有临床意义的分离菌： 在2天内被检出占94%，在3天内被检出占97% J Clin Microbiol. 2005; 43:2506-2509 97％ 做厌氧血培养的价值？ 只做需氧瓶不做厌氧瓶培养 19%-29%的菌株不能发现 5%的血培养延迟1天报告阳性结果 采集厌氧瓶同时增加采血量 每增加1 ml血液阳性率增加3% Clin Infect Dis, 1999,29:1309-1311 中华检验医学杂志，2000，23：285 Eur J Clin Microbiol Infect DDis, 2001,20:217-219 采集方式 严格无菌皮肤消毒 穿刺针穿刺抽取 无菌试管或针筒直接送检(亦可直接打入血瓶内送检-同时具增菌功能，缩短TAT) 即时送检、不能冷藏 做厌氧培养输送过程严禁接触环境氧 无菌体液采集 脑脊液采集 采集方式： 碘酒、酒精消毒皮肤L3，L4间穿刺入蜘蛛膜 穿刺后分装3-5 ml至无菌试管 检测细菌、病毒 1 ml 检测真菌、抗酸菌 2 ml 注意事项： 迅速送至实验室 细菌培养保存于35℃温箱或室温，因嗜血杆菌及奈瑟氏菌对温度敏感 检测病毒、真菌、分支杆菌4℃保存 尿液 清洁中段尿（自然排尿） 直接导尿可能下尿道细菌引入膀胱，导致继发感染 常规法消毒尿道外围 以无菌方式将导管插入膀胱 耻骨上膀胱穿刺法 (厌氧检查适用) 导管消毒后以空针抽取5-10ml尿液 有尿路感染症状但中段尿培养菌数很少 小儿收集包 留置尿导管收集法 O 穿刺导尿管吸取尿液 X 尿液收集袋中采集 女性 肥皂清洗尿道外围 以无菌纱布擦拭 用手分开大阴唇 先排出前段尿液，再以无菌宽口容器收集中段尿液 男性 肥皂清洗尿道外围 以无菌纱布擦拭 扶起茎阴翻上包皮 先排出前段尿液，再以无 宽口容器收集中段尿液