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* 化 学 化 工 学 院 教 案 所属系：化工制药系 教师姓名： 职称： 植 物 化 学 实 验 电 子 教 案 教材：化工制药系主编 植物化学实验讲义 实验三 菠菜中色素的提取 一、实验目的 二、实验原理 三、实验步骤 四、思考题 一、实验目的 1、通过菠菜色素的提取，加深对天然色素有关知 识的理解； 2、熟练掌握萃取、分液漏斗使用和紫外光谱测定 等技术； 3、掌握柱色谱的一般操作和定性鉴定方法。 色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某 一物质中的吸附或溶解性能的不同，或与其它亲和 作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质,进 行反复的吸附或分配的作用,从而将各组分分开。 　　 二、实验原理 柱色谱是将已溶解的样品加入到已装好的色 谱柱顶端，吸附在固定相（吸附剂）上，然后用 洗脱剂（流动相）进行淋洗，流动相带着混合物 的组分下移。经过反复的吸附和解吸后，各组分 在色谱柱上形成了一段一段的层带，每一色带代 表一个组分，分别收集不同的色带，就可以获得 单一的纯净物质。 叶绿素提取：高等植物体内的叶绿体色素有 叶绿素和类胡萝卜素两类，主要包括叶绿素a 、 叶绿素b、β—胡萝卜素和叶黄素等4种。 叶绿素a和叶绿素b为吡咯衍生物与金属镁的 配合物，胡萝卜素是一种橙色天然色素，属于四 萜类，为一长链共轭多烯，有α、β、γ三种异 构体，其中，β异构体含量最多。 叶黄素为一种黄色色素，与叶绿素同 存在 于植物体中，是胡萝卜素的羟基衍 生物，较易溶于乙醇，在乙醚中溶解度较 小。根据它们的化学特性，可将它们从植 物叶片中提取出来，并通过萃取、沉淀和 色谱方法将它们分离开来。 三、实验步骤 将菠菜洗净用滤纸吸干并切成碎片，用研钵捣烂，用石油- 乙醚混合溶液（体积比3：2）浸提（10mL）。抽滤后滤液移 入分液漏斗中，用水萃取以除去乙醇，注意不要激烈震荡，以 防发生乳化现象。弃去水-乙醇层，石油醚层用无水硫酸钠干燥 后滤入圆底烧瓶，在水浴上蒸去石油醚至体积为1mL为止。 1.菠菜中色素的提取 2.菠菜色素的分离 （1）装柱: 在层析柱中加入石油醚，在小烧杯中加入一 些石油醚，取少许棉花用石油醚浸湿，挤出气泡后放在 层析柱底部，在它上面放一片直径略小于管柱的滤纸或 铺一层细纱。通过玻璃漏斗缓缓加入氧化铝，同时打开 活塞让石油醚流下，以保证柱内石油醚的高度不便。氧 化铝在柱中堆积过程中可用软性物轻轻敲震层析柱以便 使氧化铝装得平实。装完后再用一圆形滤纸或一薄层细 纱覆盖在氧化铝上面。调节柱中石油醚液面高度，确保 石油醚液面高出氧化铝或细纱1～2毫升。 *