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- 2018-07-02 发布于贵州
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基因工程(上课)课件
粘粒(cosmid)(超纯质粒 ) λ噬菌体(λphage) 质粒(plasmid) 近年来发展了一系列新的载体系 统,它们能在细菌中扩增,在真 核细胞中表达。 病毒载体(virus) M13噬菌体(M13 phage) 载体(vector)主要类型: 二、常用的载体 (一)质粒 质粒(plasmid)是细菌染色体外的遗传单位,是一种环状的双链DNA分子,其结构比病毒更简单,无蛋白外壳,也无细胞外的生命周期,是仅能存在于宿主细胞质内、独立于染色体的、自主复制的遗传成分 常用质粒载体举例 1、pBR322载体 2、pUC载体 1、pBR322载体 优点: 1、分子量较小,为4363bp,不仅利于自身DNA的纯化,可容纳的外源DNA也较大。 2、具有两种抗菌素抗性基因可供转化子的选择记号。 3、具有较高的拷贝数,经过氯霉素扩增后,每个细胞中可累积1000-3000个拷贝,为重组体DNA的制备提供了极大的方便。 2、pUC18和pUC19 pUC系列质粒载体具有三个显著特点: (1)分子量更小,仅为2.7KB,容纳外源DNA量增大;具有更高的拷贝数(不用氯霉素扩增,每个细胞含500-700个拷贝)。 (2)含易于检测是否有外源DNA插入的标记基因LacZα,可利用?-互补原理进行蓝白筛选。 (3)多克隆位点区(MCS) 由人工合成的多个单一酶
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