环境监测实验11生化需氧量测定.ppt

生化需氧量测定 实验十一 一、实验目的 (1)掌握用稀释接种法测定BOD5的基本原理和操作技能。 (2)复习相关内容，提出为保证测定准确度，应当控制好哪些条件。 二、实验原理 生化需氧量(BOD)是指在规定的条件下，微生物分解水中某些可氧化物质(主要是有机物)的生物化学过程中消耗溶解氧的量，用以间接表示水中可被微生物降解的有机类物质的含量，是反映有机物污染的重要类别指标之一。 三、仪器及试剂 (一) 仪器 恒温培养箱、5～20L细口玻璃瓶、1000～2000mL量筒、溶解氧瓶（00～300mL，带有磨口玻璃塞，并具有供水封用的钟形口）、搅拌棒（棒长应比所用量筒高度长200mm，棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并有几个小孔的硬橡胶板）、虹吸管（供分取水样和添加稀释水用）。 (二)试剂 1.磷酸盐缓冲溶液 2.葡萄糖-谷氨酸标准溶液 3.稀释水 4.接种液等 四、实验步骤 (一)水样的预处理 (1)水样的pH值若超出6.5～7.5范围时，可用盐酸或氢氧化钠稀溶液调节至近于7，但用量不要超过水样体积的0.5%。若水样的酸度或碱度很高，可改用高浓度的碱或酸液进行中和。 (2)水样中含有铜、铅、锌、镉、铬、砷、氰等有毒物质时，可使用经驯化的微生物接种液的稀释水进行稀释，或提高稀释倍数，降低毒物的浓度。 (3)含有少量游离氯的水样，一般放置1～2h，游离氯即可消失。对于游离氯在短时间不能消散的水样，可加入亚硫酸钠溶液，以除去之。其加入量的计算方法是：取中和好的水样100mL，加入1+1乙酸10 mL，10％(m/V)碘化钾溶液l mL，混匀。以淀粉溶液为指示剂，用亚硫酸钠标准溶液滴定游离碘。根据亚硫酸钠标准溶液消耗的体积及其浓度，计算水样中所需加亚硫酸钠溶液的量。 (4)从水温较低的水域或富营养化的湖泊采集的水样，可遇到含有过饱和溶解氧，此时应将水样迅速升温至20℃左右，充分振摇，以赶出过饱和的溶解氧。从水温较高的水域废水排放口取得的水样，则应迅速使其冷却至20℃左右，并充分振摇，使与空气中氧分压接近平衡。 (二)水样的测定 (1)不经稀释水样的测定:溶解氧含量较高、有机物含量较少的地面水，可不经稀释，而直接以虹吸法将约20℃的混匀水样转移至两个溶解氧瓶内，转移过程中应注意不使其产生气泡。以同样的操作使两个溶解氧瓶充满水样后溢出少许，加塞水封。瓶不应有气泡。立即测定其中一瓶溶解氧。将另一瓶放入培养箱中，在20±1℃培养5d后。测其溶解氧。 (2)需经稀释水样的测定：根据实践经验，稀释倍数用下述方法计算。地表水由测得的高锰酸盐指数乘以适当的系数求得(见教材表9.13)。工业废水可由重铬酸钾法测得的COD值确定，通常作三个稀释比，即使用稀释水时，由COD值分别乘以系数0.075、0.15、0.225，即得三个稀释倍数。 稀释倍数确定后 按一般稀释法或 直接稀释法测定水样。 ① 一般稀释法：按照选定的稀释比例，用虹吸法沿筒壁先引入部分稀释水(或接种稀释水)于1000mL量筒中，加入需要量的均匀水样，再引入稀释水(或接种稀释水)至800mL，用带胶板的玻璃棒小心上下搅匀。搅拌时勿使搅棒的胶板露出水面，防止产生气泡。 按不经稀释水样的测定步骤，进行装瓶，测定当天溶解氧和培养5d后的溶解氧含量。 另取两个溶解氧瓶，用虹吸法装满稀释水(或接种稀释水)作为空白，分别测定5d前、后的溶解氧含量。 ② 直接稀释法：直接稀释法是在溶解氧瓶内直接稀释。在已知两个容积相同(其差小于lmL)的溶解氧瓶内，用虹吸法加入部分稀释水(或接种稀释水)，再加入根据瓶容积和稀释比例计算出的水样量，然后引入稀释水(或接种稀释水)至刚好充满，加塞，勿留气泡于瓶内。 其余操作与上述稀释法相同。 五、实验结果处理 (一)不经稀释直接培养的水样 BOD5(mg/L)=C1-C2 式中：Cl—水样在培养前的溶解氧浓度(mg/L)； C2—水样经5d培养后，剩余溶解氧浓度(mg/L)。 (二)经稀释后培养的水样 式中：B1——为稀释水(或接种稀释水)在培养前的 溶解氧的浓度(mg/L)； B2——为稀释水(或接种稀释水)在培养后的 溶解氧的浓度(mg/L)； f1——为稀释水(或接种稀释水)在培养液中所占比例； f2——为水样在培养液中所占比例。 六、