微透析技术基于丹皮酚前非离子体软膏皮肤药代动力学研究.docVIP

微透析技术基于丹皮酚前非离子体软膏皮肤药代动力学研究 　　[摘要] 以大鼠为动物模型， 分别给予丹皮酚前非离子体软膏及其普通软膏1 g，以生理盐水为灌流液，灌流速度为5 mL?L-1，每隔20 min收集1次，共收集12 h，采用HPLC法测定丹皮酚的含量，研究丹皮酚前非离子体软膏及其普通软膏在大鼠皮下组织液及血液中药物浓度随时间的变化过程， 并对其药代动力学参数进行比较分析。结果表明探针体外回收率Rin vitro为（54.80±1.50）%，体内回收率Rin vitro为（54.58±4.61）%；皮肤药代动力学结果表明丹皮酚前非离子体软膏与普通软膏相比，显著提高了药物在皮肤组织液中的浓度，起到了缓释、长效作用。血液药代动力学结果表明丹皮酚前非离子体软膏与普通软膏相比，丹皮酚较少的进入血液中，药物浓度平稳。故该研究所构建的丹皮酚前非离子体软膏有望为皮肤湿疹的治疗提供一种新的制剂。 　　[关键词] 丹皮酚； 前非离子体； 微透析； 经皮给药； 药代动力学 　　[收稿日期] 2013-12-13 　　[基金项目] 广东省高校中药化妆品工程中心建设项目（GCZX-A1007）；广州市白云区科技计划项目（2010-KZ-28）；广州白云区科技计划重点项目（2011-KQ-17） 　　[通信作者] 刘强，博士，教授，研究方向为中药新制剂与新剂型，Tel：（020 E-mail：gzlq2002@163.com 　　[作者简介] 江晓，硕士研究生，Tel E-mail：jiangxiaoliping@163.com 　　丹皮酚（paeonol，Pae）是毛茛科植物牡丹Paeonia suffruticosa Andr.根皮和萝?科植物徐长卿Pycnostelma paniculatum（Bunge）K.Schu全草的主要活性成分，具有镇静、催眠、解热、镇痛、抗炎、抗过敏和抗菌等多种药理活性[1]。近几年研究发现丹皮酚能抑制黑色素细胞内酪氨酸酶活性及黑色素生成，对色斑、皮肤瘙痒、牛皮癣等具有较好的治疗作用[2]。但由于其水溶性差、熔点低、易挥发和稳定性差等缺点，限制了它的使用和疗效。因此有必要利用现代药物新剂型与新技术，对丹皮酚制剂进行剂型改进。 　　前非离子体[3]（proniosomes）也叫前体非离子表面活性剂囊泡，是一种继脂质体、非离子表面活性剂囊泡（niosome）后的一种新型的药物储库型剂型，它是以非离子表面活性剂为辅料制成的囊体，使用前加水水合即可产生非离子表面活性剂囊泡的水合分散体，有效解决非离子表面活性剂囊泡溶液状态时囊泡易聚集、融合、药物易泄露等问题，是一种具有研究价值的新型制剂技术。 　　本实验以丹皮酚为模型药物，构建以丹皮酚前非离子体为载体的经皮给药系统；采用微透析采样技术与HPLC联合，实时监测丹皮酚前非离子体软膏及其普通软膏经大鼠腹部皮肤给药后皮下组织液及血液中药物浓度，从而全面评价丹皮酚前非离子体软膏在皮肤局部及全身的药物生物利用度情况，为该种制剂的研发和评价提供参考。 　　1 材料 　　高效液相色谱仪（Agilent 1100 系列：Agilent G1311A泵、Agilent G1316A紫外检测器、Agilent G1313A自动进样器），CMA/402双通道微透析泵（深圳市瑞沃德生命科技有限公司），MAB 85冷冻收集器（深圳市瑞沃德生命科技有限公司），微量注射器（深圳市瑞沃德生命科技有限公司），CMA20 ME Elite 同心环形微透析探针（深圳市瑞沃德生命科技有限公司），CP2250型电子天平（上海佑科仪器仪表有限公司）。 　　丹皮酚对照品（购自中国食品药品检定研究院，批号110708-200506）；丹皮酚（西安金绿生物工程技术有限公司，质量分数为98%）；硫化钠（杭州恒鑫达化工有限公司），水合氯醛（天津市大茂化学试剂厂），色谱级甲醇（美国默克公司）。 　　雄性Wistar大鼠，体重200～230 g，由南方医科大学实验动物中心提供，许可证号为SCXK（粤）2011-5015。 　　2 方法 　　2.1 色谱条件 　　2.1.1 色谱条件 Syncronis C18色谱柱（4.6 mm×250 mm， 5 μm）；流动相甲醇-水（60∶40）；流速1.0 mL?min-1；柱温25 ℃；检测波长276 nm；进样体积10 μL。 　　2.1.2 标准曲线的制备 精密称取丹皮酚对照品3.19 mg置1 000 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，得3.19 mg?L-1的丹皮酚储备液。精密吸取该储备液1，2，4，6，8，10 mL，分别置于10 mL量瓶中，加生理盐水稀释至刻度，配成系列对照品溶液，按2.1.1项下色谱条件进样，以质量浓度（g?