高中生物 第4章 生物化学与分子生物学技术实践 第2节 分子生物学技术学案 苏教版选修1.docVIP

第二节　分子生物学技术1．简述PCR技术的原理及基本操作步骤。(重难点)2．尝试进行DNA片断的PCR扩增。(难点)P C R 扩 增 的 原 理 和 过 程1．细胞内DNA复制的条件原料4种脱氧核苷酸模板2条DNA母链酶解旋酶和DNA聚合酶引物使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸2.PCR扩增技术(1)概念：在体外快速扩增特定基因或DNA序列(目的DNA片段)的实验技术，又称为体外基因扩增技术或DNA扩增技术。(2)PCR技术的原理：①条件：DNA模板、TaqDNA聚合酶、脱氧核苷酸引物、四种脱氧核苷酸。②PCR扩增的特点：快速、简便和灵敏。③进行PCR的先决条件：待扩增的DNA片段3′端的脱氧核苷酸序列要为已知。④引物序列确定的依据是：被扩增区域的3′端边界DNA序列。3．PCR反应的过程变性—eq \b\lc\|\rc\ (\a\vs4\al\co1(在94℃高温下，作为模板的双链DNA,解旋为单链DNA))↓退火(复性)—eq \b\lc\|\rc\ (\a\vs4\al\co1(反应体系的温度降至55℃，使得,引物与作为模板的单链DNA上的,特定部位相互配对、结合))↓延伸—eq \b\lc\|\rc\ (\a\vs4\al\co1(反应体系的温度回升到72℃左右，,在单链上4种脱氧核苷酸按照碱,基互补配对的原则连接在引物之后，,使引物链延伸，形成互补的DN