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分子生物学 学习要点
题型:名词解释分析题简答题问答题Genes perform three major roles:Replicated faithfully Chapter 2 DNA Replication: Mechanism and Enzymology 掌握DNA和RNA在结构上和功能上的异同,并能够解释为什么DNA分子上需要用T代替U以及用脱氧核糖代替核糖。掌握DNA双螺旋结构的主要内容、支持DNA双螺旋结构的主要实验证据及其生物学意义;了解大沟对于DNA与蛋白质相互作用的重要性。掌握A型、B型和Z型双螺旋结构之间的异同以及形成A型和Z型双螺旋所需要的条件。能够画出AT、AU和GC碱基对之间的氢键。掌握DNA的正超螺旋和负超螺旋形成的原因;能够使用L=T+W预测DNA过度缠绕或缠绕不足的后果;知道何种超螺旋有利于DNA复制和转录。了解DNA的变性、复性及其杂交等性质;知道能够影响DNA变性和复性的各种因素。了解影响DNA的Tm的各种因素。掌握DNA复制的一般性质,包括半保留复制、具有固定的起点、需要引物、模板需要解链、复制方向总是从5→3、半不连续复制、通常是双向复制和具有高度的忠实性等。了解由Stahl和Meselson设计的证明DNA进行半保留复制的实验思路和具体过程;掌握如何证明DNA复制的方向总是从5→3以及如何确定一个DNA分子进行双向复制还是单向复制的方法及原理;了解脉冲标记和脉冲追踪实验的原理以及如何用它们证明DNA复制的半不连续性。了解以大肠杆菌为代表的五种原核细胞DNA聚合酶(DNA聚合酶工、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和V)的结构及其功能分工;知道DNA聚合酶Ⅲ是催化大肠杆菌染色体DNA复制的主要聚合酶以及支持这种说法的证据。了解DNA聚合酶工所具有的5-外切核酸酶(简称外切酶)活性和绝大多数DNA聚合酶所具有的3一外切酶活性的生理意义;了解DNA聚合酶(Klenow酶)的三维结构与其功能之间的关系;掌握DNA聚合酶如何在聚合酶活性和校对活性之间进行切换。了解真核细胞五种主要的DNA聚合酶(DNA聚合酶αβγδ和ξ)的结构及其功能分工,以及新近发现的一些易错的DNA聚合酶(如DNA聚合酶ζηθ)在DNA跨损伤合成中的作用;知道DNA聚合酶α、δ和ε是催化真核细胞染色体DNA复制的主要聚合酶;了解DNA聚合酶Ⅲ和DNA聚合酶δ所具 有的高进行性的原因。掌握DNA聚合酶以外的其他蛋白质或酶(DNA解链酶、单链结合蛋白、引发酶、DNA拓扑异构酶、DNA连接酶、端粒酶等)在DNA复制中的作用。了解原核系统复制子和真核系统复制子的类型及其异同;了解复制起始区和双向复制之间的关系;知道每一个双向复制的复制泡具有两个复制叉,每一个复制叉含有一个前导链和一个后随链。了解大肠杆菌DNA复制四个阶段的反应;了解大肠杆菌染色体DNA复制的详细机制,并能够利用双聚合酶(二聚体)模型解释一个复制叉内的前导链和后随链如何同时进行复制;能够利用招募解释在复制起始区如何形成预引发体的结构。了解terE、D、A和terC、B是如何一起终止大肠杆菌DNA复制的。了解Dam甲基化酶在大肠杆菌DNA复制中的作用。了解真核DNA复制系统与原核复制系统的主要差别;了解SV40体外复制系统大概的复制过程以及T抗原,RFC(复制因子C),RPA(复制蛋白A),FEN—1(翼式核酸酶),增殖细胞核抗原(PCNA),DNA,聚合酶αδ和ε等在复制中所起的作用。了解自主复制序列(ARS)的结构以及ARS、起始点识别复合物(ORC)、执照因子(licensing fac-tor)、Cdc6和MCM(微小染色体维持蛋白)复合物之间的关系。了解克服线性DNA未端复制问题的四种方法,特别是端粒酶在克服真细胞染色体DNA未端复制问题中所起的作用。了解滚环复制和D环复制的基本过程及其功能。了解实现DNA复制的高度忠实性的五种机制并能解释DNA复制为什么需要RNA引物以及DNA复制方向为什么总是从5→3。Accumulate mutations thereby allowing evolutionChapter 3 DNA Damage and repairChapter 4 Transposition掌握DNA重组的定义、类型及其生物学功能。能够区分解释同源重组的Holliday模型、单链断裂模型和双链断裂模型。了解RecA蛋白、RecBCD蛋白、RuvABC蛋白的结构和功能以及它们在大肠杆菌RecBCD同源重组途芦中的作用。掌握位点特异性重组与同源重组的差别。了解attP位点、attB位点、整合酶和整合宿主因子(1HF)在入噬菌体在:进行位点特异性重组过程中的作用;了解整合酶与DNA拓扑异构酶工之间的异伺点。掌握转座重组的类型及其功能;认识以下几种常见的真核生物‘的转座子
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