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HPLC法同时测定丹参注射液中多种成分含量分析 　　哈尔滨础润医疗器械有限责任公司 哈尔滨 150040 中国论文网 /1/viewhtm　　【摘 要】目的：采用HPLC法同时测定丹参注射液中丹参素钠、香草酸、原儿茶醛、丹酚酸B、迷迭香酸等5种成分的含量。方法：采用HypersilC18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱，以乙腈-水-三氟乙酸为流动相，流速0.8mL/min，检测波长285mm，柱温30℃。结果：丹参素钠、香草酸、原儿茶醛、丹酚酸B、迷迭香酸在一定范围内，线性关系良好。加样回收率、稳定性试验的结果均符合中国药典要求。结论：采用HPLC方法测定丹参注射液，具有简便、准确、稳定性及分析率较好的优势，可广泛应用于丹参注射液的质量评价及控制中。 　　【关键词】高效液相色谱法；丹参注射液；水溶性成分 　　丹参注射液具有活血化瘀、理气通络的作用，其用药安全性高，临床通常用于治疗冠心病、心绞痛等疾病[1]。近年来，丹参注射液也被临床广泛应用于心、肝、肾、肺等疾病的治疗，深受医学界的青睬。药理研究表明[2]，丹参注射液发挥活血化瘀功效的主要成分为水溶性成分。水溶性成分主要包括丹参素钠、香草酸、原儿茶醛、丹酚酸B、迷迭香酸等。目前，关于同时测定丹参注射液中多种成分含量的报道较少，鉴于此，本研究采用高效液相色谱法对丹参注射液中多种成分含量进行同时测定，并分析该法的可行性，取得满意效果，为该类制剂的质量评价及控制提供重要参考。 　　1 材料和方法 　　1.1仪器和试药 　　选择日本Shimadzu高效液相色谱仪（SPD-10A检测器），HS色谱工作站（Waters公司），HypersilC18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱。 　　乙腈（色谱纯，山东禹王有限公司），水为蒸馏水，三氟乙酸（分析纯，上海中秦化学试剂有限公司）。 　　对照品：丹参素钠（批准文号：110855-200809）、香草酸（批准文号：10776-200402）、原儿茶醛（批准文号：110800-200506）、丹酚酸B（批准文号：111562-201001）、迷迭香酸（批准文号：111562-201001），以上对照品均由中国食品药品测定研究院提供。 　　丹参注射液为市售品（规格：10mL/支，批准文号：国药准字四川升和药业股份有限公司；规格：10mL/支，正大青春宝药业有限公司，批准文号：国药准字规格：10mL/支，批准文号：国药准字江苏神龙药业有限公司） 　　1.2色谱条件 　　色谱柱：采用HypersilC18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱；进样量20μL，流速0.8mL/min，检测波长285mm，柱温30℃；流动相：乙腈（A）-水-三氟乙酸（B），如表1所示。 　　表1 流动相梯度程序 　　时间（min） A（%） B（%） 　　0-8 2-11 98-90 　　8-20 11-25 90-76 　　20-35 25-28 76-72 　　35-45 28-49 72-50 　　1.3溶液制备 　　混合对照品溶液：选取称取好的对照品，加入65%甲醇溶液制成含0.612mg/mL丹参素钠、0.112mg/mL香草酸、0.126mg/mL原儿茶醛、1.073mg/mL丹酚酸B、1.102mg/mL迷迭香酸的溶液。 　　供试品溶液：选取丹参注射液，放置于10mL量瓶中，加水到刻度，并将其摇匀，然后采用微孔滤膜0.45μm滤过即得。 　　1.4方法学验证 　　1.4.1线性范围 　　精密量取混合对照品溶液20μL注入液相色谱仪，横坐标为色谱峰面积（X），纵坐标为进样量（Y，μg），水溶性成分回归方程、线性范围如表2所示。 　　表2 线性关系 　　成分 回归方程 n 线性范围 　　丹参素钠 Y=1.627×10-6X-0.6672 0.9995 0.06-35.24 　　香草酸 Y=4.316×10-7X-0.0014 0.9998 0.01-5.82 　　原儿茶醛 Y=1.624×10-7X-0.0016 0.9997 0.01-5.85 　　丹酚酸B Y=8.026×10-7X-0.1873 0.9999 0.11-21.37 　　迷迭香酸 Y=3.126×10-7X-0.1476 0.9996 0.11-22.04 　　1.4.2加样回收试验 　　精密量取已知浓度的样品6份，每份1mL，将其分别放于5mL棕色量瓶中，并加入6.13mg含丹参素钠、0.02mg/mL香草酸、0.59mg/mL原儿茶醛、0.02mg/mL丹酚酸B、0.26mg/mL迷迭香酸的混合对照品溶液中，然后采用蒸馏水稀释到刻度，最后按色谱条件进行测定，计算回收率，如表3所示。5个待测定