人教版-生物-选修一专题四课题一菊花的组织培养-课件.pptVIP

三、实验操作 （一）制备MS固体培养基 MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4。C保存配制好的培养基母液来制备. 1、配置各种母液 ①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存. ②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液. ③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量. 2、配置培养基 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml. ① 配制培养液 ② 调PH ③培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素. 3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌. 1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝. （二）外植体消毒 2、消毒 ①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右. ② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗. ③消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液. （三）接种 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒，酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟