乙型肝炎病原学诊断.ppt

乙型肝炎的病原学诊断 四川大学医学检验系临床微生物教研室 陶传敏 要点 简介 抗原组成 传染源 传播途径 病原学诊断 血清学模式及临床意义 Hepatitis B Virus 乙型肝炎的病原体 在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被HBV感染过，5%的人口为HBV慢性感染 中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出率达9.8% HBV virion HBV nomenclature HBV: hepatitis B virus HBsAg: hepatitis B virus surface antigen HBsAb: hepatitis B virus surface antibody HBcAg: hepatitis B virus core antigen HBcAb: hepatitis B virus core antibody HBeAg: hepatitis B virus e antigen HBeAb: hepatitis B virus e antibody 抗原组成(一)--HBsAg 位于病毒表面，是一种糖蛋白 4种亚型(adr,adw,ayr,ayw) 欧美国家: adw 我国汉族: adr 我国少数民族: ayw 判断HBV感染的指标之一 刺激机体产生保护性抗体即抗-HBs 抗原组成(二)-- HBcAg 位于Dane颗粒核心部分和肝细胞核内，在血清中不易检出游离的HBcAg 主要成分是蛋白质 刺激机体产生抗-HBc(非保护性抗体) 在乙肝急性期、恢复期和HBsAg携带者中常可检出抗-HBc 抗-HBc IgM常提示病毒处于复制状态 抗原组成(三)-- HBeAg 位于HBV的核心,是一种可溶性蛋白抗原 HBeAg和Dane颗粒出现相平行，且与DNA多聚酶在血中的消长动态相符合 血中HBeAg的出现可作为HBV复制及血清有感染性的指标 刺激机体产生抗-HBe 抗-HBe能与受染肝细胞表面的e抗原结合,通过补体介导破坏受染的肝细胞,抗-HBe的出现是预后良好的征象 抗原组成(四)-- Pre-S抗原 位于HBV的外衣壳上，有两种 刺激机体产生抗Pre-S1和抗Pre-S2，能阻断HBV与肝细胞受体结合，从而起到抵抗病毒的作用 抗Pre-S1和抗Pre-S2的出现，表示病情好转，趋向痊愈 传染源 患者 潜伏期 急性期 慢性期 无症状HBsAg携带者 高 (8%): 占45% 一生感染的危险 60% 婴幼儿感染常见 中等 (2%-7%): 占43% 一生感染的危险是 20%-60% 感染存在于所有年龄组 低 (2%): 占12% 一生感染的危险 20% 许多感染发生在成人危险组 病原学诊断(一)--抗原抗体检测 项目：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及抗-HBc IgM 方法 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay，最常用，定性) 发光免疫分析(定量) 反相间接血凝试验(少用) ELISA的基本原理 利用抗原和抗体特异性结合 主要的试剂 固相抗原或抗体 酶标记的抗原或抗体 酶的底物 ELISA的主要方法 间接法: 测定抗-HBs 夹心法：测定HBsAg和HBeAg 竞争法：测定抗-HBc 中和法：测定抗-HBe 捕捉法：测定抗-HBc IgM 病原学诊断(二)—核酸检测 核酸杂交 探针 PCR 引物 HBsAg – 感染的标志 Anti-HBs – 既往感染/接种疫苗 Anti-HBc IgM – 急性感染标志 Anti-HBc IgG – 既往或慢性感染 HBeAg – 急性病毒复制，有传染性 Anti-HBe –病毒不再复制 HBV-DNA – 急性病毒复制，比HBeAg更准确；主要用于监测治疗反应 血清学检测的临床意义 HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 临床意义 30 HBsAg先阳性后消失；抗HBc IgM阳性且高效价；先HBeAg阳性，随后抗Hbe阳性；恢复期出现抗HBs HBV DNA先阳性后消失 31 HBsAg持续阳性；抗HBcIgM低效价或者阴性；抗HBc总抗体阳性；HBeAg/抗Hbe阳性；抗HBs通常阴性 HBV DNA持续存在、效价高或低 同学们,上节课我们已经讲授了病毒性肝炎的总论和甲型肝炎的病原学诊断,这节课我们将对乙型肝炎的病原学诊断作以讲解,乙型肝炎是5种病毒性肝炎感染人数最多的一种. 小球形颗粒、管形颗粒、Dane颗粒 2 2 2 性传播 肠道外传播（血液传播） 母婴垂直传播 - Mothers who are HBeAg positive are much more likely to transmit to their offspring