微生物实验复习总结.docx

微生物实验复习1.微生物实验室的注意事项是什么?答:防止病原微生物的散布，防火，节约，标记，记录，安全，清洁与秩序。2.观察常用什么显微镜?它主要有哪几部分组成?答:观察细菌常用普通光学显微镜(油镜)。它主要有光学部分和机械部分组成，光学部分由目镜、物镜、反光镜和聚光器组成:机械部分由镜座、镜筒、镜臂、转换器，镜台、粗细调节器。使用油镜时用什么作为物镜与玻片间的介质，有几种?答:加拿大树胶、二甲苯、石蜡、松柏油、甘油、水、香油4.观察细菌时显微镜的操作步骤是什么?注意事项是什么?答:操作步骤:放置好显微镜;调节好光源;低倍镜观察，高倍镜观察，油镜观察;清洁显微镜;还原显微镜。注意事项:5.制备细菌染色标本片时应注意哪些事项?答:1)接种环要充分灭菌，避免带入新的细菌加蒸馏水时，应用接种环取少量蒸馏水于载玻片上，否则自然干燥的时间会过长。钓菌时，试管口要在酒精灯附近，避免新的细菌进入菌种内火焰固定时，热干燥的时间不宜过长，以不烫手为度水洗时，先用蒸馏水冲洗平放的玻片，再冲斜放着的玻片制片完成后，要待玻片完全干燥后才能油镜进行镜检6.图片固定的意义何在?固定时应注意什么问题?答:意义:a。除去抹片的水分，涂抹材料能很好的贴附在玻片，上，以免水洗时易被冲掉b.使抹片易于着色或更好的着色，因为变性的蛋白质比非变性的蛋白质着色力更强c.可杀死抹片中的微生物固定时注意事项:1)火焰固定时只略作加热进行固定，但不能太热，以不烫手为度，同时加热时间和加热温度也应控制好，以保持细胞形态结构的完整性。2)化学固定时，若作姬姆萨染色就不用火焰固定，而用甲醇固定。7.细菌染色的原理是什么?答:细菌的等电点较低，约在pH2-5之间，故在中性、碱性或弱碱性溶液中，菌体蛋白质电离后带负电荷，易于带正电荷的碱性染料如龙胆紫及碱性复红等结合，使细菌被染成紫色或红色。8.试述细菌革兰氏染色法的步骤及结果。答:1)加草酸铵结晶紫染色液1-2min，水洗;2)加革兰氏稀碘液1-3min,水洗;3)加95%酒精脱色0.5min，水洗;4)10倍稀释石碳酸复红液复染10-30s，水洗5)结果：蓝紫色:革兰氏阳性菌；红色:革兰氏阴性菌试述培养基制备的原则和要求。答:原则:要求:1)培养基必须含有细菌生长所需要的营养物质;2)培养基的材料和装培养基的容器应没有抑制细菌生长的物质;3)培养基的酸碱度应符合细菌生长的要求;4)所制培养基应该透明;5)培养基必须彻底灭菌，不得含有任何活的细菌。10.试述普通肉汤培养基的制备方法及期途。答:成分:牛肉膏3-5g;蛋白胨10g;氯化钠5g;水1000mL;用途:1)用作细菌的液体培养;2)检查细菌的发育状况，以及形成的沉淀物、菌膜、菌环等;3)制作固体培养基的基础。11.试述普通琼脂培养基的制备方法及用途。答:成分:普通肉汤培养基1000mL;琼脂20--30g用途:1)细菌的分离培养、纯培养;2)观察菌落形状及保存菌种;3)制作特殊培养基的基础。12.细菌分离培养的月的是什么?何为纯培养?答:目的:由于细菌感染而致病的各种标本及带菌者所需检查的各种标本，往往并非单一-的细菌，而且混有其它非致病菌，因此，当对此标本做出细菌鉴定时，就必须从标本中分离出致病菌。纯培养:只在单一一种类存在的状态下所进行的生物培养。纯培养技术:对已得到的可疑病菌进行细菌鉴定及菌种保存等培养成为纯培养技术。13.培养皿培养时为什么要倒置?答:1)便于操作;2)使接种的细菌在培养皿上生长良好;3)防止空气中的细菌进入培养皿中造成污染;4)防止蒸发的水分形成水珠掉在培养皿上破坏菌落。14.细菌分离培养的方法有哪些?常用什么方法?答:细菌分离培养的方法有划线分离培养法、斜面移植法、肉汤增菌培养等。常用方法是划线分离培养法。15.细菌菌落特征怎样描述?答:大小、表面性状、形状、边缘、隆起度、颜色及透明度、硬度、溶血。16.在挑取固体培养基上的细菌做平板分区划线时，为什么在每区之间都要将接种环上剩余的细菌烧掉?答:目的是为了达到使被检材料适当的稀释，以获得单一-的菌落，防止发育成菌苔，能更好的鉴别菌落的性状。17.革兰氏染色的关键步骤是什么?答:酒精脱色，过度时，革兰氏阳性菌易被误认为是革兰氏阴性菌;时间过短时，革兰氏阴性菌易被误认为革兰氏阳性菌。18.当你对未知菌进行革兰氏染色时，怎样保证操作正确，结果可靠?答:先做一个预实验，取己知革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌进行革兰氏染色，如实际染色结果与理论结果相等，则用这个实验参数(染色、脱色、水洗、复染时间)，否则应改变实验参数再试验，直到在当时的实验环境时的实验参数可以确保染色正确，然后再去染未知菌。19.解释所做生化实验的原理?作生化实验时有哪些注意事项?答:原理:微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之-一。细菌生