医学毕业论文无血清体外培养树突状细胞的研究.docVIP

X X 大学毕业论文无血清体外培养树突状细胞的研究姓 名：__________2014年6月25日无血清体外培养树突状细胞的研究 作者：张怀东，宋振岚,李伟平 【摘要】 本研究的目的是建立对外周血来源的树突状细胞(dendritic cell , DC)的无血清培养方案。以含胎牛血清(FCS)、人AB血清的培养液作为对照。分离健康志愿者外周血单个核细胞（PBMNC），在不同培养液中分别加入GM-CSF（100 ng/ml）、IL-4（500 U/ml）培养6天，再分别加入钙离子载体A23187（100 ng/ml）继续培养24小时，于倒置显微镜下观察细胞形态，流式细胞术分析细胞表型，MTT比色法检测各组DC刺激同种异体外周血T细胞增殖的能力和DC刺激的T 细胞对K562细胞的杀伤作用。结果表明：无血清培养组培养出典型形态的DC，其表面CD14分子的表达明显减少，CD83、HLA-DR、CDw123分子的表达明显增高，具有明显的刺激同种异体T细胞增殖的能力和DC刺激的T 细胞对K562细胞的杀伤作用。无血清组与两个含血清的对照组比较，组间无显著性差异（P0.05）。结论：无血清培养液培养的DC与含血清的培养液培养的DC相比，无显著性差异。DC无血清培养具有临床应用前景。 【关键词】 树突状细胞；无血清培养液；钙离子载体；外周血