医疗器械EO残留比色法测定步骤.doc

环氧乙烷（EO）残留量检测指导书1试验目的 检测一次性医疗器材经环氧乙烷消毒后环氧乙烷的残留量，判定是否符合国家标准规定。2. 试验原理 环氧乙烷在酸性条件下水解成乙二醇，乙二醇经高碘酸氧化生成甲醛，甲醛与品红-亚硫酸试液反应产生紫红色化合物，通过比色分析可求得环氧乙烷的含量。3. 试验仪器及试剂 移液管，容量瓶（50ml，100ml，1000ml），量筒，烧杯，分析天平，滴管，分光光度计，纳氏比色管 ，0.1mol/L盐酸溶液，5g/L高碘酸溶液，10g/L硫代硫酸钠，100g/L亚硫酸钠溶液，品红-亚硫酸试液，乙二醇标准储备液，蒸馏水 。4. 试剂的配制 0.1mol/L盐酸溶液：取9ml盐酸稀释至1000ml 5g/L高碘酸溶液：称取高碘酸0.5g，加水稀释至100ml 10g/L硫代硫酸钠：称取1.0g硫代硫酸钠，加水稀释成100ml 100g/L亚硫酸钠溶液：称取10.0g亚硫酸钠，加水稀释成100ml 品红-亚硫酸试液：称取0.1g碱性品红，加入120ml 80℃热蒸馏水溶解，冷却后加入100g/mL亚硫酸钠溶液20ml、盐酸2ml，置于暗处1h以上。试液应为无色，若发现有微红色，应重新配制。 乙二醇标准储备液：取一个外部干燥、清洁的50ml容量瓶，加水约30ml，精确称重。精确量取0.5ml乙二醇，迅速加入瓶中，摇匀后，精确称重。两次称重之差即为溶液中所含乙二醇的重量，加水稀释至刻度，混匀。乙二醇的浓度为： c=(m/50)×103式中： C：乙二醇标准储备液浓度，单位为克每升(g/L) m：溶液中乙二醇的重量，单位为克（g） 乙二醇标准溶液（c1=c×10-3）：精确量取1.0ml标准储备液，用水稀释至1000ml 5. 供试液制备方法：分模拟使用浸提法和极限浸提法。模拟使用浸提法：用0.1mol/L盐酸作为浸提介质,整个或部分与人体接触的器械在37℃(人体温度)浸提,不直接与人体接触的器械在25℃(室温)浸提.浸提时间应考虑在推荐或预期使用最为严格的时间条件下进行,但不短于1h.浸提表面为器械与药液或血液接触的表面.极限浸提法:取样品上有代表性的部位,截为5mm长碎块,称取2.0g置于容器中,加0.1mol/L盐酸10ml,室温放置1h,作为供试液;对于容器类样品,可加0.1mol/L盐酸至公称容量,在37℃±1℃下恒温1h.6. 试验步骤 6.1 取5支纳氏比色管，分别加入0.1mol/L盐酸2ml，再精确加入0.5ml、1.0ml、1.5,ml、2.0ml、2.5ml乙二醇标准溶液，再另取一支纳氏比色管，精确加入0.1ml盐酸溶液2ml作为空白对照。 6.2 分别在上述各管中加入高碘酸溶液0.4ml，摇匀，放置1h。然后分别滴加硫代硫酸钠溶液至出现的黄色恰好消失。再分别加入品红-亚硫酸试液0.2ml，用蒸馏水稀释成10ml，摇匀，35℃~37℃条件下放置1h，测量560nm波长处的吸光度，空白液做参比溶液，绘制吸光度-体积标准曲线。6.3 精确量取供试液2.0ml于纳氏比色管中，按步骤2所述操作，测得吸光度，从标准曲线上得出相应的体积。至少平行做4组。 7. 结果计算 环氧乙烷的相对含量：Ceo=1.775Vc1×103Ceo：单位产品中环氧乙烷的相对含量，单位为微克每克(μg/g) V：平行组标准曲线上找出的供试液相应体积的平均值，单位为毫升(mL) c1：乙二醇标准溶液浓度，单位为克每升(g/L) 8. 试验结果判定依据医疗器械EO残留量标准判断是否合格。环氧乙烷残留量的分析1. 原理：环氧乙烷在酸性条件下水解生成乙二醇，乙二醇经高碘酸氧化生成甲醛，甲醛与品红－亚硫酸试液反应生成产生紫红色化合物，通过比色分析法可求得环氧乙烷含量。2. 溶液配制 0.1mol/L盐酸：取9ml盐酸稀释至1000ml。高碘酸溶液(5g/L)：取高碘酸0.5g，溶于水，稀释至100ml。硫代硫酸钠溶液(10g/L)：取硫代硫酸钠1g，溶于水，稀释至100ml。亚硫酸钠溶液(100g/L)：称取10.0g无水硫酸钠，溶于水，，稀释至100ml。品红－亚硫酸试液：称取0.1g碱性品红，加入120ml热水溶解，冷却后加入10％亚硫酸钠溶液20ml，浓盐酸2ml置于暗处。试液应无色，若发现有微红色，应重新配制。乙二醇标准贮备液：取一个外部干燥、清洁的50ml容量瓶，加水约30ml，精确称重。精确量取0.5ml乙二醇，迅速加入瓶中，摇匀，精确称重。两次称重之差即为溶液中所含的乙二醇的重量，加水至刻度，混匀，按式（1）计算其浓度：C＝ ×1000 --------------------------------式（1）式中： C ------------------ 乙二醇标准贮备液浓度，单位为克每升(g/L