06-放线菌和霉菌形态观察.pptVIP

微生物实验 放线菌、霉菌的形态观察 一、实验的目的 学习和掌握观察放线菌、 霉菌形态的基本方法，了解其个体形态特征。 二、原理 1、放线菌(Actinomycetes)：放线菌是一类呈丝状生长、孢子繁殖的陆生性原核生物，归属革兰氏阳性菌，因菌落呈放射状而得名。 菌落特征：质地致密，在培养基上着生牢固，不易挑取；一般为圆形，秃平或有皱褶；菌落表面呈粉末状、颗粒状或絮状（孢子）。 细黄链霉菌(Streptomyces microflavus) 显微形态：单细胞菌丝体，菌丝内一般无隔膜。 菌丝体分为两部分： 1、基内菌丝—深入培养基中的营养型一级菌丝（较透明、浅色）。一般无隔膜，直径0.2-0.8μm，可产生各种色素。 2、气生菌丝—由基内菌丝从培养基向上伸展的二级菌丝（颜色较深），直径1-1.4μm 。 有些气生菌丝分化成各种孢子丝，呈螺旋状、波浪形或分枝状等，着生形式有丛生、互生和轮生三种。孢子的表面光滑或粗糙，圆或椭圆和杆状。孢子有各种颜色。这些形态特点都是鉴别放线菌的重要依据。 2、霉菌(Molds)： 霉菌是一些“丝状真菌(filamentous fungi)”的统称，不是分类学上的名词。凡是在基质上长成毛状、棉絮状或蜘蛛网状的丝状真菌统称霉菌。 霉菌形态比细菌、放线菌复杂，个体比较大(直径3-10μm)，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。观察时要注意菌丝粗细，菌丝体有无隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子是哪一种，孢子是怎样着生的。 根霉 黑根霉（匍枝根霉） 菌落：初期白色，老熟后灰褐色 显微形态：匍匐枝无色，假根发达呈褐色。孢子囊簇生，可形成球状接合孢子。 假根 匍匐枝 孢子囊 接合孢子 Rhizopus nigricans 曲霉 黑曲霉Aspergillus niger 菌丝体：有横隔，常无色，老熟 时变为浅黄色至褐色，有足细胞 无性生殖体： 1、分生孢子梗 2、顶囊 3、小梗 4、分生孢子 足细胞 分生孢子 有隔菌丝 小梗 顶囊 分生孢子梗 黑曲霉的显微形态 青霉 营养菌丝有横隔 分生孢子梗有横隔 无顶囊，成帚状分枝 小梗顶串生分生孢子（球形、椭圆或短圆柱状） 青霉的显微形态 三、材料 1、菌种：“5406”放线菌（细黄链霉菌）、青霉、黑曲霉、黑根霉； 2、染料：蕃红、乳酸石炭酸棉兰； 3、器材：载玻片、盖玻片、酒精灯、镊子、接种针、接种铲等。 四、方法及步骤 1、放线菌观察： 印片法：用接种铲切取5406放线菌一块（带有培养基）→在载玻片上轻压一下，弃去培养基，制成印片→固定（火焰）→蕃红染色→水洗→吸干→镜检。 扦片法： 2、霉菌：由于霉菌的菌丝较粗大，而且孢子容易飞散，如将菌体置于水中容易变形，故观察时不用水浸法制片，而将菌体置于乳酸石炭酸棉兰染液中，使细胞不易干燥。 在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉兰染液 →用镊子挑取少许霉菌菌丝，置于染色液中 →挑散菌丝 →盖上盖玻片，吸去多余染液 →镜检 放线菌：观察气生菌丝形态及有无分隔，孢子丝及分生孢子排列方式 黑根霉：假根、匍匐菌丝、孢囊梗及孢子囊 青霉、曲霉：观察菌丝形态及有无分隔，有无足细胞，分生孢子梗有无顶囊、小梗及孢子排列方式 五、观察与绘图