培养基适用性检查验证方案5.docVIP

编号: AB/06-31-B 培养基适用性验证方案 计数培养基 ****药厂有限公司 培养基适用性验证方案标题培养基适用性验证方案编 号AB/06-31-B页 码共5页、第1页执 行200 年 月 日颁发部门GMP综合办公室分发部门行政管理办公室分发数起草人起草日期审核人审核日期批准人批准日期目 录1. 概述……………………………………………………………………………...22. 验证目的…………………………………………………………………………23. 验证的范围………………………………………………………………………24. 验证人员及职责…………………………………………………………………25. 验证程序和方法…………………………………………………………………26. 验证可接受的标准………………………………………………………………37. 验证步骤…………………………………………………………………………38. 结果分析及评价：………………………………………………………………49. 验证报告…………………………………………………………………………510. 建议…………………………………………………………………………….511. 最准批准……………………………………………………………………….512. 所使用的记录………………………………………………………………….61. 验证目的：细菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的目的是确认营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基适合细菌、霉菌及酵母菌数测定。2. 参照标准：2010版中国药典二部附录XI J微生物限度检查法。3. 验证项目：营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基的适用性检查。4.验证小组人员及职责：4.1验证小组人员:小组人员职务姓 名所在部门职 务组 长质量部经 理组 员质量部QC主任组 员质量部检验员4.2验证人员职责及要求4.2.14.2.24.2.4.3验证中各部门的职责4.3.14.3.14.3.14.3.14.3.4.3.4.3.24.3.2.4.3.24.3.2.34.3.2.44.3.2.54.3.34.3.3.14.3.3.24.3.3.34.3.34.3.34.3.34.3.34.3.35. 合格标准：被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。6. 试验材料：6.1. 被验证产品：营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基6.2. 仪器设备：6.2.1. SYQ-6.2.2. SW-CJ-2A6.2.3. XSW-CJ-1A单人净化操作台6.2.4. HZMJ型霉菌培养箱 (23～6.2.5. JC303-4电热恒温培养箱 (30～356.2.66.2.7 101-2A电热鼓风干燥箱6.2.86.3. 验证用培养基 名称生产厂家批号营养琼脂培养基营养肉汤培养基玫瑰红钠琼脂培养基改良马丁培养基改良马丁琼脂培养基营养琼脂对照培养基玫瑰红钠琼脂对照培养基酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基6.4. 验证用菌株：(第 代)验证菌株培养基培养温度培养时间（小时）大肠埃希菌营养肉汤30—35℃18—24金黄色葡萄球菌营养肉汤30—35℃18—24枯草芽孢杆菌营养肉汤30—35℃18—24白色念珠菌改良马丁培养基23—28℃24—48黑曲霉菌改良马丁琼脂培养基23—28℃5—7（天）7. 菌液制备 7.1. 接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、与枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，于30～35℃培养18～24小时。取经30～35℃培养18~24小时的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、与枯草芽孢杆菌营养肉汤新鲜培养物1ml加入到9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至10-6~10-7约为50~100cfu∕ml的菌悬液备用。7.2.接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，于23～28℃培养24~48小时。取经23～28℃培养24~48小时的白色念珠菌改良马丁液体培养物1ml加入到9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至10-5约为50~100cfu∕ml的菌悬液备用。7.3.接种黑曲霉菌的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，于23～28℃培养5～7天，加入3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨脂80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，用适宜方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨脂80的0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含孢子数50～100cfu∕ml的菌悬液备用。8.菌液计数：（每种菌液接种2个平皿）大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌与枯草芽孢杆