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木霉菌生防综述 化学农药的使用,在杀死植物病原菌的同时,也杀死了环境中的有益微生物,导致了植物病原菌的抗药性的提高,还造成了环境的严重污染和农药残留等问题。随着可持续发展战略的提出,农业的可持续发展也越来越受到人们的重视,生物防治逐渐成为研究的热点,目前已经发现许多的拮抗微生物具有生防作用。其中,木霉菌就是一类普遍存在的具有重要经济意义的生防有益真菌。20世纪70年代以来,国内外对木霉的拮抗作用及其机制做了许多深入的研究,并且已经取得比较好的效果。 1.概述 1.1木霉菌 木霉菌(Trichoderma spp.)属于半知菌亚门、丝孢纲、丛梗孢目、丛梗孢科,是一类重要的生防真菌,根据Bisset系统,木霉可以分为31个种。最常见的木霉种类有哈茨木霉(T.harzianum)、康宁木霉(T. Koningii)、绿色木霉(T.viride)、长枝木霉(T.Longibrachiatum)等。木霉菌在自然界分布广泛,是土壤微生物的重要组成部分,富含有机质的土壤、腐烂的木材、植物根际等均是其良好的栖息场所。 1.2木霉菌的生防效果 木霉菌对许多植物病害的病原真菌都有很好的防止效果,例如:炭疽菌属(Colletotrichum)、丛赤壳属(Nectria)、小核菌属(Sclerotium);丝核菌属(Rhizoctonia)、葡萄孢属(Botrytis)等多种真菌。 应用最广泛、效果最好的木霉菌是哈茨木霉(T.harzianum),腐皮镰刀菌(Fusarium solani)引起的花生黑根腐病,用羧甲基纤维素作为标记的分生孢子悬浮液涂抹种子,实验证明哈茨木霉(T. harzianum )ITEM3636在减少植物发病严重度的效果比长枝木霉(T. longibrachiatum )ITEM3635要好[1]。 1.2木霉菌的生防效果 在巴西,从可可树上分离得到一种新的木霉菌(Trichoderma martiale sp. nov.),通过转录延长因子(tef1) 和RNA 聚合酶II 亚基 (rpb2)的测序以及形态学,都与绿色木霉相似。但是它在CMD和SNA产生的分散的脓包,菌丝的生长速度以及作为一种热带的内生真菌,与绿色木霉有所不同。T. martiale 对疫霉属真菌引起的可可树黑荚果病具有很好的防治效果[2]。 1.2木霉菌的生防效果 从木霉菌的商业产品TRICHODEX中分离的得到的T-39 菌株,能够有效防治草莓的炭疽病和灰霉病。在控制的温室条件下,选择了三个木霉菌菌株,分别编号T-39、 T-161和T-166,采用不同的时间、剂量来防治炭疽病和灰霉病,使用了可能的所有的组合,包括单,双或三联混合,0.4%和0.8%的浓度,设置7或10天的间隔,导致炭疽病严重度的下降。较高浓度(0.8%)表现出显著地优越性,无论是使用单一菌株(0.4%)还是两个菌联合应用(每种0.4%)的结果,都不及0.8%的效果好。只有少数的组合方法,对灰霉病的防治效果显著。分别是:T -39(0.4%)适用于2天的间隔,T -166(0.4%),T- 161(0.4%)与T -39(0.4%)联合是有效的化学杀菌剂。生物防治菌株根据内部转录间隔区序列分析进行鉴定,得到各种木霉菌的种类:T - 39(T. Hamatum),T -161(T. atroviride)和T- 166(T. longibrachiatum)[3] 1.2木霉菌的生防效果 木霉菌不仅能能对抗和控制广泛存在的生态环境中重要的植物病原真菌,病毒,细菌,还能有效控制线虫,尤其是根结线虫。根结线虫(Meloidogyne spp)是强制性寄生在植物根内寄生虫,属杂食性寄生虫,具有巨大的经济的价值。比如 M. javanica 和M. Incognita,是全球各作物产量的主要限制因素[4]。 2.木霉菌的生防机制 2.1竞争作用 木霉菌属于腐生型真菌,环境适应性比较强、生长繁殖速度快、能够迅速利用营养和占据生存空间。与其他微生物相比,木霉菌具有更强的吸收和利用土壤中的营养物质的能力,能够更好地与病原微生物进行生存空间和营养竞争,使病原微生物的生存环境得以恶化,从而抑制其对植物的危害。此外,木霉菌还可以产生醌类化合物,它具有单胺氧化酶和酪氨酸抑制活性,也具有抗菌、抗肿瘤和导泻的功能;对革兰氏阳性菌表现出显著地抑制作用;还作为线粒体氧化磷酸化的解偶联剂[5]。 2.2抗生作用 许多木霉能够产生抗菌物质阻止其拮抗微生物的定殖来抑制植物病原菌的生长而发挥其生防作用。木霉菌能够分泌大量的胞外降解酶类降解土壤中的纤维素、葡聚糖、几丁质等以得到更多的能量来满足自身生长的需要。为了抑制植物病原菌的生长,木霉菌产生抗菌物质阻止其拮抗微生物的定殖。例如,哈茨木霉(
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