发育毒性与致畸作用ppt课件.pptVIP

胚胎-胎仔发育毒性试验流程图 围产期毒性试验流程图 致畸试验 致畸作用是发育毒性中最重要、最容易观察到一种表现，故化学物发育毒性的评定主要通过致畸试验。 在致畸试验中除可观察到出生幼仔畸形外，也可同 时发现生长发育迟缓和胚胎致死。 Ⅱ段试验是评定化学物是否具有致畸作用的标准方法。 动物选择:一般要求选用两种哺乳动物 啮齿类：首先考虑大鼠，也可采用小鼠。 非啮齿类：多选家兔。 致畸试验 剂量分组 试验剂量组最少应设三个剂量组：高、中、低。 每组剂量成等比级数关系。 另设对照组。 原则上高剂量组可引起母体轻度中毒；中剂量组可允许母体出现某些极轻微中毒症状；最低剂量组不应观察到任何中毒症状。 致畸试验 动物交配 将性成熟雌雄动物按雌雄1：1或2：1比例同笼交配，每日通过阴栓或阴道涂片精子检查，将已确定受孕雌鼠随机分入各剂量组和对照组。出现阴栓或精子之日即为受孕第1天。 致畸试验 动物染毒 染毒时间：在器官形成期，即从着床期到硬腭闭合 大、小鼠孕期的第6~15天 兔孕期的6~18天。 染毒方式与途径应与人体实际接触情况一致 一般多经口给予。 致畸试验 染毒期间观察妊娠动物的： 体征和死亡（1次/日）; 体重和体重改变（ 2次/日）； 摄食量（ 1次/日）； 其他毒性研究中已证实的重要靶效应。 致畸试验 胎体检查： 自然分娩前1~2天将受孕动物处死： 一般大鼠在受孕后第19~20天； 小鼠第18~19天； 家兔在第29天。 致畸试验 剖腹处死时对所有妊娠动物进行尸体解剖和肉眼检查。 保存肉眼发现有改变的脏器，以便进行组织学评价。 取出子宫及活产胎体，并另行记录死胎和吸收胎。 活胎取出后，先检查性别，逐只称重，并按窝计算平均体重，然后由下列几方面进行畸形检查： 外观畸形 内脏及软组织畸形 骨骼畸形。 畸形检查只限活产胎体。 致畸试验 以上检查只能检出结构与形态的畸形，不能检出可能发生的生化功能或神经行为缺陷。 故为了全面了解可能存在的先天缺陷和生理功能异常，可将试验雌鼠保留1/4左右待其自然分娩，饲养观察出生幼仔以便检查。 致畸试验 广义上包括孕体结构和功能方面的各种损害，狭义 指孕体的死亡和生长发育迟缓，不包括结构畸形。 区分胚体和胎体两个阶段； 每个阶段损害的主要特点。 3.胚体-胎体毒性(embryo-fetal toxicity) 指出生前后接触有害因素，子代个体发育为成体之 前诱发的有害影响，主要表现为： 发育生物体死亡 生长改变 结构异常 功能缺陷 4.发育毒性（developmental toxicity） 发育毒性的主要表现 发育生物体死亡：包括 受精卵未发育即死亡； 胚泡未着床即死亡（早早孕丢失）； 着床后发育到某一阶段死亡。 早期死亡被吸收或自子宫排出（自然流产）； 晚期死亡成为死胎。 发育毒性的主要表现 生长改变（altered growth ）:生长迟缓，生长发育指标低于正常对照的均值2个标准差。 结构异常（structural abnormality）: 指胎儿形态结构异常，即畸形。 功能缺陷（functional deficiency）:即胎仔的生化、生理、代谢、免疫、神经活动及行为的缺陷或异常。 5.出生缺陷（birth defect):指婴儿出生前即已形成的发育障碍，包括畸形和功能缺陷。如先天性心脏病、唇腭裂、神经管畸形、尿道下裂、隐睾症等。 6.不良妊娠结局（adverse pregnancy outcomes)：指妊娠后不能产生外观和功能正常的子代。 二、发育毒性的作用特点和影响因素 与对其他器官系统的毒性作用相比，外源化学物的 发育毒性作用有显著的特点: 致畸作用受到多种因素的影响，包括敏感期、遗传 类型、剂量、母体毒性等。 （一）发育各阶段发育毒性作用特点和致畸敏感期 卵子受精后一直发育直至出生为止，都称为孕体 。 从受精到新生儿的发育过程经历着: 着床前期 器官形成期 最容易引起畸形的阶段 胎儿期 围生期和出生后的发育期 1.着床前期 又称为分化前期，从受精时算起，到完成着床之前。 该期限在人类为11-12天；啮齿动物为前6天。 这时受损伤的胚泡容易死亡，称为着床前丢失。有些 化学毒物作用于胚泡，使之死亡而丢失。 着床前期发育毒性 一般认为，此时很少发生特异的致畸效应。 也有着床前期接触毒物导致胎儿畸形的例子。如： 甲基亚硝脲 子代神经管缺陷 小鼠妊娠 第2.5天、3.5天和4.5天 腭 裂 孕体着床后直到硬腭闭合的一段时间。是发生结构 畸形的关键期(critical period)，也称致畸敏感期。在 此期间，大多数器官对致畸作用有特殊敏感期，即