实验七.血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳分析5.pptVIP

血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳分析 【目的要求】 1.掌握琼脂糖凝胶电泳分离血清脂蛋白的 原理,掌握正常人血浆脂蛋白的分类。 2.熟悉琼脂糖凝胶电泳的特点和操作要点。 3.了解电泳带中脂蛋白显色特点 【实验原理】 琼脂在化学上是由琼脂糖和琼脂胶组成的复合物，为一种含硫酸根、带负电荷的多糖类物质。琼脂是直链多糖，它由D-半乳糖和3，6脱水L-半乳糖的残基交替排列组成。 琼脂糖主要通过氢键形成凝胶。电泳时，因为凝胶中含水量大（98～99%），近似自由电泳，固体支持物的影响较少，故电泳速度快、区带整齐。而且由于琼脂糖不含带电荷的基团，电渗影响很小，是一种良好的电泳材料，分离效果较好。 血清中脂类物质均与载脂蛋白结合成水溶性脂蛋白形式存在。各种脂蛋白所含载脂蛋白的种类及数量不同，因而不同脂蛋白颗粒大小相差很大。因此，以琼脂糖凝胶为支持物，在电场中可使各种脂蛋白颗粒分开。 琼脂糖凝胶电泳分离血清脂蛋白方法简单。将血清脂蛋白用脂类染料苏丹黑（或油红等）进行预染。再将预染过的血清置于琼脂糖凝胶板上进行分离。通电后，可以看到脂蛋白被分成三条区带，从负极到正极依次为β脂蛋白（最深）、前β脂蛋白（最浅）及α脂蛋白（比前β脂蛋白略深），在原点处应无乳糜微粒。 【实验器材】 1.电泳仪、电泳槽 2.载玻片 3.台式离心机 【实验操作】 1.预染血清? 血清0.2ml中加苏丹黑色液0.02