食用菌地组织分离技术.pptVIP

实验三 原种的制作技术 一、实验目的 1. 掌握几种原种培养基的配方及其制作。 2. 了解食用菌原种的制作原理，掌握制备过程。 3.了解灭菌的基本原理，掌握蒸气灭菌锅的使用方法。 二、实验材料 灭菌锅、超净工作台、培养室、菌种试管 玉米粒、铝锅、石膏、碳酸钙、蔗糖、天平、水桶、大盆、牛皮纸、小线绳、玻璃瓶、橡皮筋 、 75％酒精消毒瓶、75％酒精消毒棉球瓶、接种针、火柴、记号笔。 原种培养基的常用配方 1.玉米粒培养基 配方： 玉米粒98% 石膏1% 碳酸钙1% 2.棉籽壳培养基 配方：棉籽壳88% 麸皮10% 糖1% 碳酸钙1% 3.木屑培养基 配方：木屑78% 麸皮20% 糖1% 碳酸钙1% 三 实验内容与方法 1.配方:玉米粒98%，石膏1%，碳酸1%。 2.按制种需要量称取玉米粒、石膏粉和碳酸钙。 3. 将称好的玉米粒倒入盆内，用清水清洗几次，去掉杂质16～24 h，至玉米粒充分吸足水分，但不过分膨胀和不开口为宜。 4 .将泡好的玉米粒放在锅内，加水浸过玉米粒，放在电炉上煮。检查，一直煮到种子内无白心为止，切不可将种皮煮破。 5. 将煮好的玉米粒捞出控干水，使玉米粒含水量达55％～60％。 三 实验内容与方法 6.将控干的玉米粒放在盆内，然后将称好的石膏粉和碳酸钙倒入盆中搅拌均匀。 7.装瓶，将拌匀的培养料装入菌种瓶或菌种袋中，装料要均匀，装至瓶肩处或菌种袋的2/3处。 8.装好瓶后，将瓶口包一层防潮纸，用线绳将瓶口扎好，准备灭菌。 9.灭菌,方法同母种的灭菌方法，灭菌压强一般为0.12 ～0.14 Mpa，灭菌时间为1 .5～2. O h。 三 实验内容与方法 10.接种，接种间消毒与母种相同。接种时一人手拿母种试管，在酒精灯火焰旁用接种钩(铲)将试管内斜面上菌丝体切成小块；另一人将原种瓶瓶口倾斜在酒精灯火焰旁，将瓶盖掀开一个小缝，这时拿母种试管的人迅速将切好的一小块母种移接到原种瓶内，瓶口用酒精灯烧一下，然后立即把原种瓶口盖严，扎好。一般一管母种接九瓶(袋)左右原种。 11.把接种好的原种瓶送到所需温度的培养箱或培养室内培养。 12.一接种后应经常检查有无杂菌污染。发现污染瓶，立即挑出。 13．生长好的原种菌丝洁白、粗壮、纯净，可用来扩大繁殖栽培种。 (三)原种质量检查 无论玉米粒原种还是棉籽壳原种，接种后在25℃左右培养20～40 d，菌种即可长满瓶。品质优良的原种，菌丝洁白、纯净、有食用菌特有的香味。若出现黄、绿、黑等颜色的毛状物或菌瓶内有酸、臭味道，即是污染杂菌，不能使用。应将其灭菌后在远离培养场地处深埋。 四、作业 1.如何获得优质的原种? 2.制作原种过程中应注意哪些问题? 实 验 四 栽 培 种 的 制 作 技 术 一、实验目的 通过实验，使同学们掌握栽培种的制作方法和接种技术。 二、实验材料 超净工作台、培养室、土式常压灭菌锅、高压灭菌锅、棉籽壳(或玉米芯、木屑)、麦麸(或玉米面、米糠)、过磷酸钙、石膏、水桶、盘称、搪瓷量杯、、聚丙烯塑料袋或菌种瓶、颈圈、棉花、牛皮纸、细线绳、接种勺(或大镊子、接种铲)、小镊子、酒精灯、75％消毒酒精瓶、75％消毒酒精棉球瓶、火柴、记号笔。 三、实验内容与方法 （一)培养基的制作 1．配方 玉米芯78％、麦麸或米糠13％、玉米面7%、过磷酸钙1％、糖1％(料：水。1：l 3～1：I 4)。 2．拌料 根据制种需要按各种营养成分的配比称量各种原料。然后将玉米芯和麦麸玉米面先混合一起。过磷酸钙、蔗糖等混溶在拌料用的水中，搅拌均匀后，泼洒到玉米芯上再搅拌均匀。 3．测培养料水分 培养料拌好后，用手抓一把培料握在手中，用力捏紧，从手指缝中有水印但无水滴滴下．这时的含水量合适，为62％～64％，若含水量不足．可再加少量的水，充分搅拌均匀，再检测，直至含水量合适为止。 三、实验内容与方法 4．装瓶 将拌好的培养料装入玻璃瓶中，边装边压实，一直装到玻璃瓶容积的4／5左右。 5．封瓶口 将瓶口用防潮纸盖好，用绳扎好。 擦净玻璃瓶外面所粘的培养料。 (二) 灭 菌 由于栽培种数量大,小型灭菌锅不合适，有条件的单位可以购置大型立式或卧式电热高压蒸汽灭菌锅。此锅容量较大，一次可以消毒17 cm× 33cm塑料袋90袋左右。灭菌时应按灭菌锅的使用说明进行操作。栽培种由于装量较多且较实，一般要求1．4～1. 5Mpa，灭菌1.5—2.0 h。 (三)接种和培养 1.接种 接种间消毒与母种相同，菌种袋放入接种室或接种箱内