高考生物一轮复习课件第37讲基因工程.pptVIP

(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是________。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加__________的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是______________________________________。 12 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 13 解析　目的基因的两端都有BamHⅠ的识别序列，质粒的启动子后抗生素A抗性基因上也有BamHⅠ的识别序列，故应选用的限制酶是BamHⅠ，此时抗生素B抗性基因作为标记基因，故筛选时培养基中要添加抗生素B。若重组质粒已导入了受体细胞却不能表达，很可能是因为用同种限制酶切割后，目的基因和质粒有两种连接方式，导入受体细胞的重组质粒可能是目的基因和质粒反向连接形成的。 答案　BamH Ⅰ　抗生素B　同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接 12 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 13 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 12.浙江大学农学院喻景权教授课题组研究发现，一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因(如P450基因和红霉素抗性基因)的表达和酶活性都得到提高，在这些基因“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒甚至无毒物质，有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作，请回答下列问题： 13 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 (1)获得油菜素内酯合成酶基因的方法有_________________。步骤①用PCR技术扩增基因时用到的耐高温酶通常是指_____；步骤②用到的酶有___________________________________。 (2)图中导入重组质粒的方法是__________________，在导入之前应用一定浓度的______________________处理受体细菌。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 (3)导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用____________________制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入________________可将含有目的基因的细胞筛选出来。 (4)请你为该课题命名：_____________________________。 13 解析　进行基因工程操作时，首先要获取目的基因，其方法有多种：从cDNA文库中获取、从基因组文库中获取、人工合成目的基因或PCR扩增技术等。在构建基因表达载体的过程中，用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶。图中的受体细胞是细菌，故用感受态细胞法导入基因表达载体，导入后，需检测和筛选。从图中可以看出，最终是通过对照实验来检验转基因细菌对土壤中残留农药的分解能力。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 答案　(1)从cDNA文库中获取、从基因组文库中获取、人工合成目的基因或PCR扩增技术(任选其中两项即可)　TaqDNA聚合酶　限制酶和DNA连接酶 (2)感受态细胞法　氯化钙溶液 (3)红霉素抗性基因　红霉素 (4)探究油菜素内酯能否促进土壤中农药的分解 13 12 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 13 13.下图是某种动物蛋白质工程示意图，请据图回答下列问题： (1)目前，蛋白质工程中难度最大的是图中编号______所示的过程，实现③过程的依据有__________________________ _________________________________。 解析 蛋白质工程中最难的是设计预期的蛋白质结构。由设计好的蛋白质氨基酸序列根据翻译中密码子与氨基酸的关系推算出mRNA，再通过mRNA与DNA间的碱基互补配对原则逆推出相应的脱氧核苷酸序列。 氨基酸与密码子的对应关系； ① mRNA与DNA间的碱基互补配对原则 12 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 13 (2)在⑤过程中，________连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端。 解析 T4DNA连接酶既可以连接黏性末端又可以连接平末端。 T4DNA 12 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 13 (3)为获得较多的受精卵进行研究，⑥过程需用激素做____________处理。若⑥过程所得的卵母细胞是从屠宰母畜的卵巢中获得